實(shí)驗(yàn)室如何檢測(cè)及解決PCR污染的方法
生物實(shí)驗(yàn),大多數(shù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)都是微觀的,,基于細(xì)胞,,分子,蛋白水平,,而這些微觀樣本對(duì)外界環(huán)境的影響敏感,,比如溫度、ph值,、酶解,、損傷等,在我們盡力呵護(hù)樣本的生存環(huán)境的同時(shí),,污染也是需要注意的頭等大事,,要堅(jiān)決避免環(huán)境中的“雜質(zhì)”的亂入,包括樣本污染,,試劑儀器交叉污染,、產(chǎn)物氣溶膠污染等對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。“易查不易察”,,污染來(lái)的悄無(wú)聲息,,防不勝防,假陽(yáng)性結(jié)果讓無(wú)數(shù)生物學(xué)子抓狂和崩潰,。
小編今天就來(lái)扒一扒生物實(shí)驗(yàn)室污染之PCR實(shí)驗(yàn)污染你不知道的事,。
在眾多的生物實(shí)驗(yàn)室,分子生物學(xué)檢測(cè)方法如PCR因其高靈敏度,、快速,、操作方便等優(yōu)勢(shì)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用,,不過(guò)正是由于它靈敏度*,極微量的污染源都有可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性,,所以對(duì)環(huán)境污染的控制也極為嚴(yán)格,。面對(duì)眾多的污染源,比如樣本交叉污染,、試劑儀器交叉污染,、克隆質(zhì)粒污染、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染,、還有極容易忽視的氣溶膠污染,,氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點(diǎn)分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦?xí)r,,比如在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管,,開蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染,。據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆??珊?8000拷貝,因而由其造成的污染是一個(gè)非常重要而被忽視的污染源,。
雖然這些污染對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響已經(jīng)受到了廣泛重視,,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)污染控制都采取了各種辦法,比如定期大掃除清理,、劃分操作區(qū)域,、試劑分裝、操作謹(jǐn)慎,、重復(fù)實(shí)驗(yàn),、多角度驗(yàn)證結(jié)果。但是微量的核酸片段就能被擴(kuò)增,,所以對(duì)污染物的控制不僅僅是做到這些就能夠杜絕和避免的,,關(guān)鍵是需要從源頭控制。目前多數(shù)生物試驗(yàn)室,,分子實(shí)驗(yàn)每天都在大規(guī)模進(jìn)行,,污染源已經(jīng)無(wú)處不在,特異性的,,非特異性的,,同源的,非同源的,,廣泛分布在樣本容器,、實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面,試劑溶液中,、儀器表面內(nèi)管附著等等,,你以為普通的清理就能解決這些污染源嗎,?必須是不行的,實(shí)驗(yàn)室大拿們都為了清除這些污染源研究出好多種方法,,整理跟大家共享,。