總黃銅的提取和測(cè)定

總黃銅的提取和測(cè)定目的要求

     學(xué)習(xí)黃銅類化合物的測(cè)定原理和方法

總黃銅的提取和測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理

    黃銅類化合物是植物的重要次生代謝產(chǎn)物,，也是一些保健品和中藥材的有效成分之一,。黃銅類化合物的定量方法常用的有HPLC法和分光光度法。在實(shí)際生產(chǎn)和科研過(guò)程中,，對(duì)于黃銅單體的定量常采用HPLC法,，而對(duì)總黃銅的測(cè)定，考慮到方法的簡(jiǎn)便,、快捷以及可行性,，多采用在堿性介質(zhì)中加鋁鹽顯色的分光光度法。在堿性條件下黃銅類化合物與鋁鹽形成配位化合物,、在500nm波長(zhǎng)有zui大吸收峰,。標(biāo)準(zhǔn)品選用蘆丁。

試劑和器材

1）、試劑

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品

5%NaNO₂,；10%Al（NO3）3,；5%NaOH；70%乙醇,。

2,、材料

新鮮銀杏葉

3）、器材

容量瓶10mL（×7）,，25mL（×1）,，100mL（×2）；吸管0.2mL（×2）,，1mL（×2）,，2mL（×

1. ，5mL（×1）,；分光光度計(jì),。

操作方法

1）、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線

    稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品5mg,；用70%乙醇溶解,，定溶于25mL容量瓶，搖勻,，得0.2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,。

    吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.2,、0.4,、0.6、0.8,、1.0,、1.2mL，分別置于10mL容量瓶中,，加入5%NaNO2 0.4mL,，搖勻，放置6min,；加入10%Al（NO3）3  0.4mL,，搖勻，放置6min,；加入5%NaOH4.0mL,，搖勻，放置15min,。以試劑空白作為參比溶液,。用1cm比色皿,，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

2）,、總黃銅的提取

    把新鮮的銀杏葉低溫烘干，使水分小于8%,制成干粉,。稱取干粉1.0g,，置于100mL容量瓶中，加入70%乙醇30mL,，浸泡24h,。超聲波提取30min，過(guò)濾用70%乙醇定溶于100mL容量瓶中,，得到黃銅提取液,，代用。

3）,、測(cè)定

    吸取黃銅提取液1.00mL，置于10mL容量瓶中,，加入5%NaNO3  0.4mL,，搖勻，放置6min,；加入10%Al（NO3）3  0.4mL,，搖勻，放置6min,；加入5%NaOH  4.0mL,，再加水至刻度，搖勻,，放置15min,。以試劑空白作為參比溶液。用1cm比色皿,，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,，由標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算總黃銅含量。

注意事項(xiàng)

     對(duì)于某些熱敏成分的提取,，采用超聲波破碎法效果較為理想,。由于此過(guò)程是一個(gè)物理過(guò)程，浸提過(guò)程中無(wú)化學(xué)反應(yīng),，被浸提的生物活性物質(zhì)在一定時(shí)間內(nèi)保持不變,。