喆圖小編今天來說說酵母菌,，酵母菌是一些單細(xì)胞真菌，并非系統(tǒng)演化分類的單元,。酵母菌是人類文明史中被應(yīng)用得早的微生物
大多數(shù)酵母菌的菌落特征與細(xì)菌相似,，但比細(xì)菌菌落大而厚，菌落表面光滑,、濕潤,、粘稠，容易挑起,，菌落質(zhì)地均勻,，正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一,，菌落多為乳白色,，少數(shù)為紅色，個(gè)別為黑色,。未發(fā)現(xiàn)其有性階段的酵母菌稱假酵母,。
大多數(shù)酵母菌為腐生，其生活適pH為4.5-6,，常見于含糖分較高的環(huán)境中,，例如果園土、菜地土及果皮等植物表面,。酵母菌生長迅速,，易于分離培養(yǎng),，在液體培養(yǎng)基中，酵母菌比霉菌生長得快,。
利用酵母菌喜歡酸性環(huán)境的特點(diǎn),，常用酸性液體培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得酵母菌的培養(yǎng)液（這樣做的好處是酸性培養(yǎng)條件則可抑制細(xì)菌的生長），然后在固體培養(yǎng)基上劃線分離之,。
酵母菌細(xì)胞的死活可用美藍(lán)進(jìn)行區(qū)別,。原因是美藍(lán)為弱氧化劑，無毒,，且還原后變?yōu)闊o色,。如果是活的酵母細(xì)胞，由于新陳代謝不斷進(jìn)行,，細(xì)胞內(nèi)氧化還原電勢(shì)頗低,，還原力強(qiáng)，若有美藍(lán)染料進(jìn)入活的酵母細(xì)胞內(nèi),，即被還原成無色,，而死的細(xì)胞或代謝緩慢的衰老,，由于它們無還原能力或還原能力弱,，仍可被美藍(lán)染成藍(lán)色或淺藍(lán)色。
將少量酵母菌接種到一定體積的,、適合的新鮮培養(yǎng)基中,，在適宜的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，定時(shí)測定培養(yǎng)液中的菌量,，以菌量的對(duì)數(shù)作縱坐標(biāo),，生長時(shí)間作橫坐標(biāo)，繪制的曲線叫生長曲線,，它反映了單細(xì)胞微生物在一定環(huán)境條件下于液體培養(yǎng)時(shí)所表現(xiàn)的群體生長規(guī)律,。依據(jù)其生長速率的不同，一般可把生長曲線分為延緩期,、對(duì)數(shù)期,、穩(wěn)定期和衰亡期。這四個(gè)時(shí)期的長短因菌種的遺傳性,、接種量和培養(yǎng)條件的不同而有所改變,。因此通過測定微生物的生長曲線，可了解各菌的生長規(guī)律,，對(duì)于科研和生產(chǎn)都具有很重要的指導(dǎo)意義,。
實(shí)驗(yàn)材料與培養(yǎng)基制備
1，蘋果,、梨等,、0.1%美藍(lán)染液,、1ml的吸管、無菌培養(yǎng)皿,、試管,、高壓鍋、恒溫培振蕩養(yǎng)箱等,。
2,，馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）；
原料：馬鈴薯（80g）,、葡萄糖（8g）,、瓊脂（4g）、蒸餾水（400ml）,。
配制方法：
（1） 先將馬鈴薯去皮,，切片，稱80克并加蒸餾水400ml,，煮沸半小時(shí),， 用紗布過濾，補(bǔ)足蒸餾水量至400ml,，制成20%的馬鈴薯汁,。
（2） 在200ml20%的馬鈴薯汁中加入4g瓊脂，4g葡萄糖,，煮沸熔化,， 補(bǔ)足水分并在115℃條件下高壓滅菌20分鐘。制備馬鈴薯葡萄糖瓊脂平板,。
3,，豆芽汁液體培養(yǎng)基：稱取黃豆芽50g，加水100ml,，煮沸1h,，過濾后 補(bǔ)足水分，121℃濕熱滅菌后存放備用,，此即為50%的豆芽汁,。取50%豆芽汁200ml，葡萄糖50g,，水800ml,，自然pH，在115℃條件下高壓滅菌20min,。
4,，YPD培養(yǎng)基：配方：1%酵母膏，2%蛋白胨，2%葡萄糖,。 配制方法（1000ml配方）：溶解10g酵母膏,，20g蛋白胨于900ml水中， 121℃20min高壓滅菌,。同時(shí)將20g葡萄糖加入100ml水中,，121℃20min高壓滅菌。然后在超凈臺(tái)中兩者混合,。
注：葡萄溶液和酵母膏,、蛋白胨溶液混合后在高溫下可能會(huì)發(fā)生化學(xué)反 應(yīng)，導(dǎo)致培養(yǎng)成分變化,，所以要分別滅菌后在混合,，但要注意無菌操作。
實(shí)驗(yàn)步驟
1,、接種：取一小塊果皮,，不需沖洗，直接接入豆芽汁液體培養(yǎng)基試管 中,，置28-30℃,，培養(yǎng)24h，可見培養(yǎng)液變渾濁,。
2,、培養(yǎng)，用無菌吸管取上述培養(yǎng)后培養(yǎng)液0.1ml,，注入另一管豆芽汁 液體培養(yǎng)基中,，置28-30℃再培養(yǎng)24h或稍長（過長則霉菌長出）,。
3,、觀察：用無菌操作法取少許菌液置于載玻片中央的0.1%美藍(lán)染液中， 混勻后加蓋玻片制成水浸片,，先用低倍鏡后換用高倍鏡觀察酵母菌的形態(tài)和出芽生殖情況,。 活酵母可使美藍(lán)還原，從而使菌體不著色,，用此方法可判斷酵母菌的死 活,。
4、分離：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基溶化后制成平板,。用劃線法分離酵 母培養(yǎng)液,，從而得到單個(gè)菌落。
5,、生長曲線測定：挑取單個(gè)菌落接種于30mlYPD液體培養(yǎng)基中,，30℃、 180r/min恒溫振蕩培養(yǎng)24h，取擴(kuò)大培養(yǎng)的菌液的菌液按照1:100的接種量接種于3瓶50mlYPD培養(yǎng)液中,，同樣條件下振蕩培養(yǎng),，并分別于培養(yǎng)后2、4,、6,、8、10,、12,、14、16,、18,、20、22,、24,、26、28,、30h取菌種培養(yǎng)懸液5ml,，以未接種的酵母YPD液體培養(yǎng)基校正7200型紫外可見分光光度計(jì)的零點(diǎn)，在波長600nm處比色測定菌液OD600值,。以各時(shí)間點(diǎn)菌液的吸光光度值（OD600）為縱坐標(biāo),，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，繪制出酵母工程的生長曲線,。
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