一,、試驗(yàn)?zāi)康?ensp;
脂肪酶催化油脂分解,研究適脂肪酶添加量,、適PH,、溫度、反應(yīng)時(shí)間,。
二,、試驗(yàn)理論基礎(chǔ)
脂肪酶催化 三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯類(lèi)的 水解、醇解,、酯化,、轉(zhuǎn)酯化及酯類(lèi)的逆向合成反應(yīng)。
三,、試驗(yàn)材料
大豆油,、脂肪酶(酶活10萬(wàn)單位)、聚乙烯醇,、去離子水,、氫氧 化鈉、酚酞,、高速攪拌機(jī),、恒溫?fù)u床、PH計(jì)、分析天平,、三角瓶,;
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 量取10ml油脂,,10ml聚乙烯醇,,高速攪拌機(jī)中攪拌至油脂 *分散至聚乙烯醇中;
2. 量取30ml去離子水,,加入到1體系中,,高速攪拌形成穩(wěn)定乳 化體系;
3. NaoH溶液調(diào)節(jié)PH值,,加入一定量脂肪酶,,震蕩。
4. 放入40℃,、150r/min恒溫?fù)u床反應(yīng)一定時(shí)間后,,用 0.1mol/LNaoH 滴定測(cè)定脂肪酸含量。 五,、實(shí)驗(yàn)結(jié)論
1. 脂肪酶適反應(yīng)PH為7.5,。 PH為7-8時(shí),反應(yīng)結(jié)束上層顏色黃色加深,,下層顏色接近透明,, 其中經(jīng)脂肪酸測(cè)定,PH為7.5時(shí)脂肪酸含量較高,。其他反應(yīng)PH值上層顏色仍接近乳白色,。
2. 脂肪酶適反應(yīng)時(shí)間為24h左右 PH為7.5的條件下,酶的添加量取800PPm,考察適反應(yīng)時(shí)間24,、36,、48h,。經(jīng)脂肪酸含量測(cè)定24-48h脂肪酸含量相差不大,,可取短時(shí)間。
3. 脂肪酶添加量為600ppm左右,。 分別取300-800ppm濃度梯度進(jìn)行脂肪酶添加量考察,。經(jīng)脂肪酸含量測(cè)定600ppm脂肪酸含量相對(duì)較高。
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