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原位雜交檢測技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)

時間:2015-5-21閱讀:254

關(guān)鍵詞:原位雜交檢測技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌原位雜交檢測技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,,質(zhì)量保證,*。
原位雜交檢測技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系,。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:   http://www.,。,。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>(1)樣品的固定;
(2)樣品的制備和預(yù)處理,;
(3)預(yù)雜交,;
(4)探針和樣品變性;
(5)用不同的探針雜交以檢測不同的靶序列,;
(6)漂洗去除未結(jié)合的探針,;
(7)檢測雜交信號,進(jìn)行結(jié)果分析
(1)石蠟切片(5 um),,常規(guī)脫蠟水化: 二甲苯10min×3次,、質(zhì)量濃度為100%乙醇5 min×2次、95%乙醇5 min,、70%乙醇5min,、50%乙醇5 min、自來水洗5 min,。
(2)正常山羊血清封閉,,37℃ ,30min,;
(3)加入I抗(兔抗鼠白蛋白),,37℃ ,1 h,;
(4)Ⅱ抗(FITC標(biāo)記,,羊抗兔IgG,),,37℃ ,,30min,;
(5)8%硫氰酸鈉,80℃ ,,10 min,;
Devil以新鮮配制的胃蛋白酶(4 mg/m1)將切片于37℃消化1~1.5 h;以甘氨酸溶液終止消化
(7)4%多聚甲醛固定2 min,;梯度酒精脫水,空氣干燥,;
Musical Note將15ul Y染色體探針(cy3標(biāo)記)加于組織上,,蓋上蓋片,置于雜交盒內(nèi),,60℃變性10 min,;37℃ ,避光雜交,;
(9)50%甲酰胺/2×SSC,,37℃洗滌5 min;2×SSC,,37℃洗滌5 min,;
(10)0.1% 吐溫20/4×SSC,37℃洗滌10 min,,干燥后鏡檢,。
雜交所用的探針大致可以分類三類:
1)染色體特異重復(fù)序列探針,例如α衛(wèi)星,、衛(wèi)星III類的探針,,其雜交靶位常大于1Mb,不含散在重復(fù)序列,,與靶位結(jié)合緊密,,雜交信號強(qiáng),易于檢測,;
2)全染色體或染色體區(qū)域特異性探針,,其由一條染色體或染色體上某一區(qū)段上不同的核苷酸片段所組成,可由克隆到噬菌體和質(zhì)粒中的染色體特異大片段獲得,;
3)特異性位置探針,,由一個或幾個克隆序列組成。
可采用不同類型的封片液,。如果封片液中不含有Mowiol(可使封片液產(chǎn)生自封閉作用),,為防止蓋片與載片之間的溶液揮發(fā),可使用指甲油將蓋片周圍封閉,。封好的玻片標(biāo)本可以在-20~-70℃的冰箱中的暗盒中保持?jǐn)?shù)月之久,。

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