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關(guān)鍵詞:原位雜交檢測(cè)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡(jiǎn)介:世界*品牌原位雜交檢測(cè)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,,質(zhì)量保證,*。
原位雜交檢測(cè)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系,。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,,承諾客戶不成功不收費(fèi)。我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
產(chǎn)品品牌: http://www.。,。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
(1)樣品的固定,;
(2)樣品的制備和預(yù)處理;
(3)預(yù)雜交,;
(4)探針和樣品變性,;
(5)用不同的探針雜交以檢測(cè)不同的靶序列;
(6)漂洗去除未結(jié)合的探針,;
(7)檢測(cè)雜交信號(hào),,進(jìn)行結(jié)果分析
(1)石蠟切片(5 um),常規(guī)脫蠟水化: 二甲苯10min×3次,、質(zhì)量濃度為100%乙醇5 min×2次,、95%乙醇5 min、70%乙醇5min,、50%乙醇5 min,、自來水洗5 min。
(2)正常山羊血清封閉,,37℃ ,,30min;
(3)加入I抗(兔抗鼠白蛋白),,37℃ ,,1 h;
(4)Ⅱ抗(FITC標(biāo)記,,羊抗兔IgG,,),37℃ ,,30min,;
(5)8%硫氰酸鈉,80℃ ,,10 min,;
Devil以新鮮配制的胃蛋白酶(4 mg/m1)將切片于37℃消化1~1.5 h;以甘氨酸溶液終止消化
(7)4%多聚甲醛固定2 min,;梯度酒精脫水,,空氣干燥;
Musical Note將15ul Y染色體探針(cy3標(biāo)記)加于組織上,,蓋上蓋片,置于雜交盒內(nèi),,60℃變性10 min,;37℃ ,,避光雜交;
(9)50%甲酰胺/2×SSC,,37℃洗滌5 min,;2×SSC,37℃洗滌5 min,;
(10)0.1% 吐溫20/4×SSC,,37℃洗滌10 min,干燥后鏡檢,。
雜交所用的探針大致可以分類三類:
1)染色體特異重復(fù)序列探針,,例如α衛(wèi)星、衛(wèi)星III類的探針,,其雜交靶位常大于1Mb,,不含散在重復(fù)序列,與靶位結(jié)合緊密,,雜交信號(hào)強(qiáng),,易于檢測(cè);
2)全染色體或染色體區(qū)域特異性探針,,其由一條染色體或染色體上某一區(qū)段上不同的核苷酸片段所組成,,可由克隆到噬菌體和質(zhì)粒中的染色體特異大片段獲得;
3)特異性位置探針,,由一個(gè)或幾個(gè)克隆序列組成,。
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