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更新時(shí)間：2024-08-24 09:42:55瀏覽次數(shù)：2084評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100U |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | E8350 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標(biāo)簽 |
索萊寶重組牛腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶,。該酶經(jīng)HPLC純化，純度高,，特異性高,，并且不含其他蛋白 酶。腸激酶（EC3.4.21.9）是一個(gè)特定的蛋白酶,，它可以切割前面含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn)：天 冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-賴氨酸,。腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白，以除去不需要的 融合標(biāo)簽,。
來源：重組大腸桿菌 理論MW：25,850Da 活性：1U定義為在25℃,，12h~16h之內(nèi)，將50ug保存于25mMTris-HCl8.0緩沖液中的融合蛋白切割95%所 需的酶量,。
高特異性
1）特定的蛋白酶,，切割前面含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn)：天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬 氨酸-賴氨酸(DDDDK)
2）不含其他蛋白酶,無非特異性切割
圖一：SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果，純化的腸激酶一個(gè)單一的主帶
圖二：1U的EK作用于50ug底物0min,10min,20min,30min,40min,50min,60min后的SDS-PAGE分析
圖三：1U,2U,5U,10U的EK作用于50ug底物4h后和1U的EK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析
在＞200mM咪唑,，或＞200mMNaCl,，或＞5%甘油，酶切效果受影響,。
可參照以下推薦方法進(jìn)行酶切：
1）為獲得理想酶切結(jié)果,，請(qǐng)將樣品透析到25mM Tris-HCl pH8.0緩沖液中,，再進(jìn)行酶切。
2）若不便透析,，可將樣品稀釋,，咪唑含量在100mM以下，NaCl濃度在50mM以下,，甘油濃度小于5%以 下進(jìn)行酶切,，酶的用量與蛋白的比例不變（即1U酶切50µg蛋白）,。
3）如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種,，且不便去除，此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長酶切時(shí)間,，也 可達(dá)到較好酶切效果,。
具體參照索萊寶的使用說明
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