日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

脯氨酸含量測定試劑盒說明書
可見分光光度法 ：BC0290 ：50T/48S
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存,。
試劑一：4℃保存,。（自備）
試劑二：液體45 mL×1瓶， 4℃保存,。
試劑三：4℃保存,。（自備）
標(biāo)準(zhǔn)品：脯氨酸 10mg，4℃保存,。
脯氨酸(Pro)廣泛存在于動(dòng)物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,，逆境條件下,，植物體內(nèi)Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,，抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯氨酸,。因此，脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標(biāo)之一,。
用磺基水楊酸（SA）提取Pro,，加熱處理后，Pro與酸性茚三酮溶液反應(yīng)生成紅色,；加甲苯萃取后,，在520nm測定吸光度。
可見分光光度計(jì),、水浴鍋,、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、1 mL玻璃比色皿,、冰乙酸、甲苯,、研缽,、冰和蒸餾水。
一、脯氨酸含量測定試劑盒樣品測定的準(zhǔn)備：
1,、細(xì)胞,、細(xì)菌或組織樣品的制備 ：
細(xì)菌或細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，棄上清,；按照每100萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒,，間隔10秒,，重復(fù)30次），之后置沸水浴振蕩提取10min,；10000g,，常溫離心10min，取上清,，冷卻后待測,。
組織：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿,；之后置沸水浴振蕩提取10min,，10000g，常溫離心10min,，取上清,，冷卻后待測。
2,、血清（漿）樣品：取100μL血清（漿）加入1mL提取液,，充分混勻，之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,，10000g,，常溫離心10分鐘，取上清,，冷卻后待測,。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理：稱取1mg,，將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15,、10、8,、6,、4、2,、1,、0 μg/ml,。
二、測定步驟：
1,、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長520nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、取0.5mL上清液（或稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品）+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二于有蓋試管中，置沸水浴中保溫30min（蓋緊,，防止水分散失）,，每10min振蕩一次。
3,、待冷卻后,，在試管中加入1mL試劑三，振蕩30s,，靜置片刻，使色素轉(zhuǎn)試劑三,；吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中,，用試劑三調(diào)零，于520nm波長處比色,，記錄吸光值,。
4、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品吸光值和濃度,，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
三、Pro含量計(jì)算：
1,、通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品脯氨酸含量(y為脯氨酸含量,，μg/mL；x為OD值)
2,、按照細(xì)菌,、細(xì)胞個(gè)數(shù)或者組織鮮重計(jì)算，先根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得y值：
細(xì)胞或細(xì)菌中脯氨酸含量(μg/104 cell)= y÷細(xì)胞濃度(104 cell/mL)
Pro含量(μg/g mass) =y÷樣本鮮重(g/mL)
3,、血清（漿）中脯氨酸含量,，先根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得y值：
Pro含量[μg/mL血清（漿）] = y÷0.1mL血清（漿）/mL 提取液中含有蛋白沉淀劑，提取的上清液不能用于蛋白濃度的測定,。