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更新時(shí)間:2024-08-21 16:41:04瀏覽次數(shù):2225評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml 500ml 1L 大包裝詢價(jià) |
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貨號(hào) | S8741 | 主要用途 | 凝膠過濾填料,有機(jī)溶劑純化 |
瓊脂糖凝膠CL-4B
貨號(hào):S8741
規(guī)格:10ml/100ml/500ml
產(chǎn)品說(shuō)明
瓊脂糖凝膠CL-4B是在瓊脂糖凝膠4B的基礎(chǔ)上通過交聯(lián)使微球的剛性增強(qiáng),,理化性能提高,,有利用于工業(yè)生產(chǎn)。該介質(zhì)用于生物大分子的凝膠層析,。本品呈白色球狀凝膠,,無(wú)嗅、無(wú)味,、無(wú)肉眼可見雜質(zhì),。本產(chǎn)品具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性,、高流速,、較好的機(jī)械性能、可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),,非特異性吸附低,,回收率高,,可用有機(jī)溶劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì),、核酸及多肽的凝膠色譜純化。
項(xiàng)目 | 說(shuō)明 |
基質(zhì) | 4%交聯(lián)瓊脂糖 |
排阻極限 | 6×104~2×107 (球蛋白) |
形狀 | 球形 |
粒徑 | 45~165 μm |
檢測(cè)流速 | 30 cm/h* |
耐熱 | pH7水中120℃20min |
耐壓 | 0.025 MPa |
pH穩(wěn)定性 | 3~13(長(zhǎng)時(shí)間),,2~14(短時(shí)間,,在位清洗) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍,;可耐有機(jī)溶劑,,如乙醇、DMF,、THF,、DMS、CH3Cl,、丙酮,、二甲基甲酰胺、二氯乙烷,、吡啶,、乙腈 |
檢測(cè)條件 | 層析柱10mm×300mm *柱床高15cm,25℃,,流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl |
瓊脂糖凝膠CL-4B操作步驟:(僅供參考)
1,、裝柱
凝膠過濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,,一般通過柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠,,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm,。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn),。
以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,,接好管路。
(1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫,。配制緩沖液,。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液,。
(2)選擇一根一定直徑的柱子,,長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,,抽干,,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿,。
(3)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡,。
(4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),,注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(5)打開蠕動(dòng)泵,,讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過,,使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子,,到柱床穩(wěn)定,。
(6)推薦用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,,上好柱頭,。
2、平衡:讓緩沖液以一定流速流過柱子,,到流出液電導(dǎo)和pH不變,。
3、上樣:
(1)樣品用緩沖液配制,,要離心和過濾后上樣,。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,,再上樣,。
(2)介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái),。
(3)上樣體積約為柱體積的1~2%,,越小分離越好。
4,、洗脫:用緩沖液洗脫,,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變,。
5,、再生:一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用,。
6,、在位清洗
(1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。
(2)對(duì)沉淀蛋白,、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除,。
(3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白,、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,,用少3倍緩沖液平衡柱子,。
7、去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí),?;蛴靡韵路椒ú襟E去除:
(1)2倍柱體積的70%乙醇;
(2)2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5,;
(3)1倍柱體積4M尿素,;
(4)3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl;
以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制,。
8,、 消毒:用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子,。
注意事項(xiàng)
在裝柱,、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干,,氣泡進(jìn)入
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇),,通風(fēng)、干燥,、清潔的地方,。不能冷凍。
用過的柱子貯存在4℃(20% 乙醇),。
本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸,;避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。
保質(zhì)期:5年,。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)