選擇合適的重組蛋白產(chǎn)品,，對你得到正確的實驗結果關重要,，可從以下幾點進行選擇：
1、蛋白來源
對于一些蛋白,，需要進行一系列的翻譯后修飾才能成為具有活性的成熟蛋白,。細菌不能提供這樣的修飾,，而哺乳動物細胞可以。因此,，選購時應注意蛋白的來源,。例如，novaprotein的人IL-4是在E. coli中制備的,，金斯瑞的人IL-4是在哺乳動物CHO細胞中制備的,。
當然除了上面提到的兩種表達系統(tǒng)外，還有酵母和昆蟲表達系統(tǒng),，四種系統(tǒng)各有優(yōu)劣,，選重組蛋白是一定要注意。
表達 | 細胞 | 優(yōu)點 | 缺點 |
原核 | E.coli | 繁殖快,、成本低,、產(chǎn)量高；遺傳背景及基因表達調(diào)控機制清楚,；易于大規(guī)模培養(yǎng),，成本低廉 | 蛋白常為包涵體，純化困難,；無糖基化（分泌蛋白,，細胞膜上蛋白不可用），生物活性不定,；無翻譯后修飾,，內(nèi)毒素含量高 |
酵母 | Pichia | 使用簡單，表達量高,，His-tag便于純化,，一定的翻譯后加工可進行糖基化修飾，操作簡單,，適合大規(guī)模生產(chǎn),；可誘導表達，也可分泌表達,，產(chǎn)物便于純化 | 有時會出現(xiàn)蛋白切割問題,；糖基化不能滿足要求 |
昆蟲 | High-5 | 產(chǎn)量高，翻譯后加工與哺乳動物相似,；對于部分有毒性或較難表達蛋白有優(yōu)勢,；無內(nèi)毒素污染 | 蛋白活性不如哺乳動物；適合表達激酶等定位于細胞內(nèi)的真核蛋白 |
哺乳 | CHO; HEK293 | 完善的翻譯后加工,，活性接近天然蛋白 | 周期長、技術要求高,；表達產(chǎn)量低 |
2,、種屬來源
蛋白的種屬來源常見的有人源,、小鼠源和大鼠源等。一般來說,，不同種屬之間的蛋白同源性在80%以上就可視為有交叉活性,，可推薦使用。
3,、生物活性和穩(wěn)定性
蛋白的純度,、內(nèi)毒素水平和批次間穩(wěn)定性等直接會影響實驗結果，因此,，高品質的蛋白產(chǎn)品會嚴格監(jiān)控這一環(huán)節(jié),，并且提供詳細數(shù)據(jù)。同時,，在選擇蛋白產(chǎn)品時還需考慮其生物活性,。
一般記得以下五點就行：
· 大多數(shù)人類細胞因子對小鼠細胞都有活性。
· 許多小鼠細胞因子對人類細胞也有活性,，但比相應人類細胞因子活性低,。
· 一些人類的細胞因子（如IL-7）在小鼠細胞中表現(xiàn)出比小鼠細胞因子更高的活性。
· 干擾素,、GM-CSF,、IL-3 和IL-4 有物種特異性，對于非人類細胞幾乎沒有活性,。
· 成纖維細胞生長因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子是高度保守的,，在其它的動物細胞中也能表現(xiàn)很好的活性。
4,、蛋白形式
通常有兩種形式：含牛血清白蛋白BSA或不含BSA,，不含BSA一般用“CF"表示。加入BSA可以提高蛋白質的穩(wěn)定性,，增加了貯存期限,。含BSA的蛋白可以作為細胞組織培養(yǎng)物或者ELISA實驗中的理想標準品，而CF形式的蛋白尤其適用于活體實驗,。以R&D systems的Human IL?4為例,，就有兩種形式，買之前要先明確自己用來做什么實驗的,。
5,、查閱文獻
這個是快捷的方法，怎么去查文獻是我們必須要掌握的技能,。
雖有萬般方法,，但是只要你會查閱文獻，則萬事皆定。
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