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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-01-24 11:15:51瀏覽次數(shù)：433
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T-25 Flask |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CBP71465 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
CTR&RAMP3 CRE-Luc HEK293
| I. Background | |
| 降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)家族包括 CGRP 本身,、降鈣素(CT),、腎上腺髓質(zhì)素(AM)和 胰島淀粉樣肽(AMY)。 胰淀素（Amylin）受體的三種類型的已被確定,，即 AMY1,，AMY2 和 AMY3。 胰淀素受體屬于 B 類 GPCR,，是異二聚體復(fù)合物,，由降鈣素受體(CTR)與受體活性修飾蛋白 (RAMPs)結(jié)合形成。該受體的 CTR 組分具有相同的 GPCR 結(jié)構(gòu)：7 個(gè)跨膜相互連接的α-螺 旋,，將細(xì)胞外信號(hào)傳遞到細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞質(zhì)信號(hào)級(jí)聯(lián),。RAMP 有三種類型(RAMP1、RAMP2 和 RAMP3),，它們共享 31%的氨基酸序列,，具有相似的基本結(jié)構(gòu)。RAMP 是將 CTR 轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì) 胞膜并調(diào)節(jié)其配體特異性的重要肽,，它可以改變特定 GPCR 的藥理學(xué),、功能和細(xì)胞運(yùn)輸。 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中 Amylin 受體的激活已被證明可以提高 cAMP,，并被認(rèn)為與 Gs 蛋白和 腺苷酸環(huán)化酶的刺激有關(guān),。在 RAMPs 的存在下，其與胰淀素的結(jié)合親和力可以被修飾,。 CTR 和 RAMP1 或 CTR 和 RAMP3 的異質(zhì)結(jié)構(gòu)被認(rèn)為有利于與胰淀素結(jié)合,，介導(dǎo)大腦中的 生理功能。AMY3 的激活刺激 G 蛋白 Gαs,，進(jìn)一步控制腺苷酸環(huán)化酶(AC),，隨后增加細(xì)胞 cAMP。cAMP 與 PKA 調(diào)控亞基(R2)的結(jié)合誘導(dǎo) PKA 四聚體全酶解離,，導(dǎo)致 PKA 催化亞 基的激活,。cAMP 激活的 PKA 參與調(diào)控 ERK1/2 的活性。ERK1/2 通路的觸發(fā)可能導(dǎo)致 Ca 2+ 分布不均勻,，引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體功能障礙,，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。此外,，cAMP 刺激 AKT 進(jìn)一 步導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子 cFos 的表達(dá),。 | |
| II. Description | |
CTR&RAMP3 CRE-Luc HEK293 報(bào)告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) CTR 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,，原理見下圖所示。 Figure 1. CTR&RAMP3 CRE-Luc HEK293 細(xì)胞模型原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | HEK293 |
| Stability: | 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | DMEM + 10%FBS + 200μg/ml Hygromycin B+ 2μg/ml Puromycin + 5μg/ml Blasticidin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen immediately upon delivery |
| Application(s): | Functional assay for CTR/RAMP3 |
| Transducer: | Gs |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Human |
| Tissue: | kidney |
| Morphology: | Epithelial |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
Figure 2. WB of CTR&RAMP3 CRE-Luc HEK293
Figure 3. Recombinant CTR&RAMP3 CRE-Luc HEK293 stably expressing CTR.
Figure 4. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001（we strongly suggest to purchase from Cobioer). Dose Response of CTR/RAMP3 Agonists in CTR&RAMP3 CRE-Luc HEK293 (C19).
Figure 5. HTRF cAMP Assay with CTR&RAMP3 CRE-Luc HEK293 (C19). . | |
