HCoV-229E和HCoV-OC43都是在1960年代發(fā)現(xiàn)的，多年來一直被*為引起普通感冒的原因,，并在一生中引起頻繁的再感染,。在成年人中,，這些病毒每年占急性呼吸道疾病的 4％至15％，在高峰期高達35％,。兒童的年發(fā)病率達到8％,，發(fā)病率高達20％。據(jù)報道,，成人中229E和OC43病毒的感染頻率為每年每100人15至25人不等,，其中有80％的感染者是先前具有該感染病毒抗體的人。

NCBI收錄序列為KX344031.1,，全長30713bp,，基因編碼5個結(jié)構(gòu)蛋白：S，M,，N,，HE和E。

• S蛋白（spike protein）穿過病毒膜,，并在冠狀病毒“冠狀”中形成特征性的尖峰,。它被高度糖基化，可能形成同源三聚體,，并介導受體結(jié)合和與宿主細胞膜融合,。刺激中和抗體的主要抗原以及細胞毒性淋巴細胞的重要靶標在S蛋白上。
• M蛋白（membrane glycoprotein）具有一個短的N末端結(jié)構(gòu)域,，該結(jié)構(gòu)域在包膜的外表面上突出并跨過該包膜3次,，在包膜內(nèi)留有一個長的C末端。M蛋白在病毒裝配中起重要作用,。
• 核衣殼蛋白N（nucleocapsid phosphoprotein）與RNA基因組結(jié)合形成核衣殼,。它可能參與病毒RNA合成的調(diào)控，并可能在病毒出芽過程中與M蛋白相互作用,。
• HCoV-OC43中發(fā)現(xiàn)血凝素酯酶糖蛋白（HE）,。血凝素部分與宿主細胞表面的神經(jīng)氨酸結(jié)合，可能使病毒初吸附到膜上,。酯酶從神經(jīng)氨酸裂解乙?；９跔畈《镜腍E基因與C型流感HE糖蛋白具有序列同源性,，可能反映了這兩種病毒之間的早期重組,。
• 小包膜E（envelope protein）蛋白將其C末端留在包膜內(nèi)，然后跨越該包膜或彎曲并在內(nèi)部投射其N末端,。

根據(jù)CDC和WHO的介紹,，針對HCoV-OC43的核酸診斷一般是針對RdRP (RNA-dependent RNA polymerase)、Gene N和Gene E， Gene S更多用于對應藥物和疫苗的開發(fā),。

以往針對試劑盒檢測限的性能評價,，一般是選擇體外轉(zhuǎn)錄的RNA、或者臨床陽性病毒來作為標準品,，用于性能評價,。但是兩者都具有很明顯的確定，首先體外轉(zhuǎn)錄的RNA,，一般是很純,，單一，不涉及提取,，不符合臨床病毒的微環(huán)境,，因此必然造成檢測靈敏度被高估，這也是存在高概率假陰性的主要原因,；再次臨床陽性病毒,，即使是滅活的病毒，也是存在很大的生物安全隱患,，因此要求實驗室級別為P3-P4,，大部分開發(fā)診斷試劑盒單位都不滿足改要求,，另外臨床陽性病毒也是來源很有限,，不能被穩(wěn)定供應，反復用于試劑盒的性能評價,。

因此,，有病毒的完整包膜結(jié)構(gòu)，有HCoV-OC43對應的核酸序列,，但是生物安全風險較低的假病毒標準品,，完美的克服了如上的缺點，非常適合用于核酸診斷性能評價的標準品,。

科佰生物開發(fā)了基于NCBI公布序列的假病毒產(chǎn)品,，用于各診斷試劑盒的性能評價，其對應的優(yōu)點如下：

1. hCov-OC43-N 假病毒標準品,，區(qū)別于以往體外合成的RNA,、臨床陽性活病毒，完美克服兩者的缺點,，真正適合用于試劑盒的性能評價,，包含檢測限、特異性,，重復性等,；
2. 根據(jù)HCoV-OC43冠狀病毒的特點，選取了RdRp(RNA-dependent RNA polymerase)、Gene E(envelope protein),、Gene N(nucleocapsid phosphoprotein)合計3個區(qū)段的序列,，用于假病毒的包裝，3個區(qū)段很好的表征了HCoV-OC43的特征序列,；
3. 科佰生物設(shè)計了ddPCR體系的引物,、探針序列，可不需要構(gòu)建標準曲線的前提下完成對假病毒的QC拷貝數(shù)檢測,，非常準確表征標準品的拷貝數(shù),，而且克服了Q-PCR分析CT值的相對判斷標準的不準確性；
4. hCov-OC43-N 假病毒標準品,，無致病性,，可再生，質(zhì)控方法可靠,，批次間穩(wěn)定,，可以長期穩(wěn)定制備和供應，而且要求實驗室生物安全級別為P2,，滿足很多單位的安全需求,。