關鍵詞:細胞轉染|實驗技術服務
簡介：世界*品牌細胞轉染|實驗技術服務原裝,，質量保證,*,。
細胞轉染|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,，承諾客戶不成功不收費,。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果,。
產品品牌：   http://www.。,。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
一,、細胞傳代
1. 試驗準備：200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球,，廢液缸,，試管架，微量移液器,，記號筆,，培養(yǎng)皿，離心管,。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,，用1ml的PBS溶液洗滌兩次
3. 用tip頭加入1ml Trypsin液，消化1分鐘(37℃,，5%CO2 ),。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞*從壁上脫落下來為止,。
4. 加入1ml的含血清培養(yǎng)基終止反應,。
5. 用Tip頭多次吹吸，使細胞*分散開,。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,，1000rpm離心5min,。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇0.8X106個細胞加入一個35mm培養(yǎng)皿,。
8. 將合適體積*培養(yǎng)液加入離心管中,，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布,。
9. 將培養(yǎng)皿轉入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，第二天轉染。
二,、細胞轉染
1. 轉染試劑的準備
① 將400ul去核酸酶水加入管中,，震蕩10秒鐘，溶解脂狀物,。
② 震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1-1：2/脂質體體積：DNA質量)來轉染細胞,。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基,。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,，再次震蕩,。
3. 將混合液在室溫放置10―15分鐘。
4. 吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,，用PBS或者無血清培養(yǎng)基清洗一次,。
5. 加入混合液，將細胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一個小時,。
6. 到時后,，根據(jù)細胞種類決定是否移除混合液，之后加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24-48小時,。
三,、第二次細胞傳代
1. 在轉染后24小時，觀察實驗結果并記錄綠色熒光蛋白表達情況,。
2. 再次進行細胞傳代,，按照免疫染色合適的密度0.8X105個細胞/35mm培養(yǎng)皿將細胞重新轉入培養(yǎng)皿中。
3. 在正常條件下培養(yǎng)24小時后按照染色要求條件固定,。