實時熒光定量PCR儀,，由熒光定量系統(tǒng)和計算機組成，用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光,。與實時設備相連的計算機收集熒光數據,。數據通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示,。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數的圖表。原始數據收集后可以開始分析,。實時設備的軟件能使收集到的數據進行正?；幚韥韽浹a背景熒光的差異。正?；罂梢栽O定域值水平,，這就是分析熒光數據的水平。

醫(yī)療應用

⑴ 病原體檢測

目前,，采用定量PCR檢測技術可以對淋球菌,、沙眼衣原體、解脲支原體,、人類乳頭瘤病毒,、單純皰疹病毒、人類免疫缺陷病毒,、肝炎病毒,、流感病毒、結核分枝桿菌,、EB病毒和巨細胞病毒等病原體進行定量測定,。與傳統(tǒng)的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少,、快速簡便等優(yōu)點,。

如：結核菌基因診斷的意義主要表現在：

a.區(qū)分TB與其它分枝桿菌；

b.檢測TB耐藥基因,；

c.提高TB的陽性檢出率,。

⑵ 產前診斷

到目前為止,，人們對遺傳性物質改變引起的遺傳性疾病還無法治療,，只能通過產前監(jiān)測，減少病嬰出生,，以防止各類遺傳性疾病的發(fā)生,，如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生，從孕婦的外周血中分離胎兒DNA,，用實時熒光定量PCR儀檢測其Y性別決定區(qū)基因是一種無創(chuàng)傷性的方法,，易為孕婦所接受。

⑶ 藥物療效考核

對乙型肝炎病毒(HBV),、丙型肝炎病毒(HCV) 定量分析顯示：病毒量與某些藥物的療效關系,。HCV高水平表達，干擾素治療作用不敏感,，而HCV低滴度,，干擾素作用敏感,；在拉米夫定治療過程中，HBV-DNA的血清含量曾有下降,，隨后若再度上升或超出以前水平,，則提示病毒發(fā)生變異。如PCR技術在HBV檢測中的應用及意義：

a.了解乙肝病毒在體內存在的數量,。

b.是否復制,。

c.是否傳染，傳染性有多強,。

d.是否有必要服藥,。

e.肝功能異常改變是否由病毒引起。

f.判斷病人是適合用哪類抗物,。

g.判斷藥物治療的療效,。

⑷ 腫瘤基因檢測