問：用HPLC進行分析時保留時間有時發(fā)生漂移,，有時發(fā)生快速變化，原因何在?如何解決?
答：關(guān)于漂移問題：
1,、溫度控制不好,，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定
2,、流動相發(fā)生變化,，解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
3,、柱子未平衡好,，需對柱子進行更長時間的平衡
關(guān)于快速變化問題：
1、流速發(fā)生變化,，解決辦法是重新設(shè)定流速,，使之保持穩(wěn)定
2、泵中有氣泡,，可通過排氣等操作將氣泡趕出,。
3、流動相不合適,，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進行適當(dāng)混合
問：液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
答：1、篩板堵塞或柱失效,，解決辦法是反向沖洗柱子,，替換篩板或更換柱子。
2,、存在干擾峰,，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子
問：為什么進樣器內(nèi)的玻璃襯套會對色譜行為造成影響?
答：進樣器內(nèi)的玻璃襯套主要有下列作用：
1,、提供一個溫度均勻的汽化室,，防止局部過熱。
2,、玻璃的惰性不如不銹鋼好,，減少了在汽化期間樣品分解的可能性。
3,、易于拆換清洗 ,，以保持清潔的汽化室表面，一些痕量非揮發(fā)性組分會逐漸積累殘存于汽化室，高溫下會慢慢分解,，使基流增加,，噪聲增大，通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響,。
4,、可根據(jù)需要選擇管壁厚度及內(nèi)徑適宜的玻璃襯套，以改變汽化室的體積,，而不用更換整個進樣加熱塊,。從以上幾個方面可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。
問：HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
答：1,、樣品量不足：解決辦法為增加樣品量
2,、樣品未從柱子中流出：可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動相或柱子
3、樣品與檢測器不匹配：根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器
4,、檢測器衰減太多：調(diào)整衰減即可,。
5、檢測器時間常數(shù)太大：解決辦法為降低時間參數(shù)
6,、檢測器池窗污染：解決辦法為清洗池窗,。
7、檢測池中有氣泡：解決辦法為排氣,。
8,、記錄儀測壓范圍不當(dāng)：調(diào)整電壓范圍即可。
9,、流動相流量不合適：調(diào)整流速即可,。
10、檢測器與記錄儀超出校正曲線：解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,，重作校正曲線,。
問：我購買的液相色譜柱驗收測試時柱壓過高，請問為什么?
答：柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題,。其原因有多方面,，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因,。
1,、拆去保護柱，看柱壓是否還高,，否則是保護柱的問題,，若柱壓仍高，再檢查,；
2,、把色譜柱從儀器上取下,，看壓力是否下降，否則是管路堵塞,，需清洗,，若壓力下降，再檢查,。
3,、將柱子的進出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動相沖洗柱子,，(此時不要連接檢測器,，以防固體顆粒進入流動性)。這時,，如果柱壓仍不下降,，再檢查；
4,、更換柱子入口篩板,，若柱壓下降，說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升,。
