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更新時間：2024-10-18 13:37:50瀏覽次數(shù)：33080次

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WB實驗代測

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western blot檢測服務(wù)

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實驗代測服務(wù)項目: 常規(guī)生化實驗檢測常規(guī)生化檢測 elisa實驗代測 western blot檢測服務(wù) 放免代測服務(wù) 免疫組化檢測服務(wù) 免疫學(xué)檢測服務(wù) 蛋白質(zhì)代測服務(wù) 病理形態(tài)學(xué)檢測實時熒光定量PCR檢測服務(wù)

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產(chǎn)品簡介

供貨周期	現(xiàn)貨	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

上海信帆生物提供WB實驗代測服務(wù),，代測時間為7-10天,，提供實驗數(shù)據(jù),，包括所有試劑,，提供分析數(shù)據(jù),、步驟等，如果你想了解該實驗服務(wù)的詳細(xì)信息,，咨詢！

詳情介紹

所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

Western Blotting檢測,WB實驗代測,，WB實驗服務(wù)

Western blot樣本要求

客戶需新鮮或正確保存的蛋白樣品，檢測目的蛋白的一抗（或由本公司代購）,。樣品要求為：

1,、裂解樣品總蛋白量>500ug/樣品。

2,、細(xì)胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml,。

3、組織樣品總蛋白濃度>10-15mg/ml,。

Western blot結(jié)果及數(shù)據(jù)提供

內(nèi)參蛋白和目的蛋白曝光膠片各一張,，可提供掃描圖，實驗報告,，包括整個試驗流程所涉及的實驗數(shù)據(jù)和實驗步驟,。如需進行蛋白純化服務(wù)，將提供檢測報告

WB實驗代測

服務(wù)內(nèi)容

我們提供從蛋白制備,、蛋白電泳到Western blot檢測的全流程服務(wù),，如需要還可進行灰度分析。

說明

1,、建議提供目的蛋白陽性表達樣品（純蛋白或有陽性表達的細(xì)胞或組織）作為陽性對照,。

2、每張膜檢測1-8個樣品,。

3,、如果一抗由客戶提供,，請在正確條件下保存，避免污染及反復(fù)凍融,。

關(guān)于Western blot實驗異常分析

『無信號』

原因	建議
一抗與二抗不匹配	選擇針對一抗來源種屬制備的二抗,；
一抗不識別目的的種屬的蛋白	1)檢查抗體的說明書，適用范圍內(nèi)是否包含目的種屬 2)使用陽性對照來檢查抗體質(zhì)量
一抗或二抗不足,，沒有足夠的抗體結(jié)合到目的蛋白	1)降低抗體稀釋倍數(shù),，增加抗體濃度 2)延長孵育時間
封閉劑與一抗有交叉反應(yīng)	改變封閉劑
抗原不足	1)每個泳道加入20-30ug總蛋白 2)制備樣品要使用蛋白酶抑制物及使用陽性對照
在檢測的組織內(nèi)目的蛋白表達水平低	檢測樣本不表達目的蛋白選擇表達量高的細(xì)胞作為陽性對照，用于確定檢測樣本是否為陰性,，也可更換細(xì)胞系
蛋白轉(zhuǎn)膜效率低	1)利用麗春紅檢測轉(zhuǎn)膜效率;檢查轉(zhuǎn)移裝置是否電極弄反 2)轉(zhuǎn)移前膜是否用甲醇侵泡過
膜過渡洗滌	減少洗滌時間和強度
疊氮鈉抑制二抗活性	二抗稀釋液內(nèi)不用疊氮鈉

『沒有特異條帶』

原因	建議
細(xì)胞系傳代過多后蛋白表達譜發(fā)送變化	1)使用未傳代或傳代次數(shù)較少的細(xì)胞系進行樣品制備
蛋白本身有很多修飾	1)查閱文獻,，確定目的蛋白是否存在多種修飾
蛋白被消化或者降解	1)蛋白樣品確保未被污染，確保含有蛋白酶抑制劑
所檢測蛋白存在多種剪接體,，導(dǎo)致分子量大小不同	1)查閱文獻或者通過搜索數(shù)據(jù)庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
一抗或二抗?jié)舛雀?/span>	1)減低抗體濃度
洗滌不夠	1)充分洗滌

『條帶大小不正確』

原因	建議
目的蛋白被降解	確保蛋白樣品未被污染,，確保含有蛋白酶抑制劑
存在不同的剪接體	查閱文獻或者通過搜索數(shù)據(jù)庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
重組蛋白	檢測是否存在額外加入的蛋白
特殊蛋白如MDM2等	仔細(xì)閱讀抗體說明書

尊敬的客戶：
本公司有放射免疫技術(shù)服務(wù)、蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù),、免疫組化,、PCR技術(shù)服務(wù)、生物信息學(xué)數(shù)據(jù)分析等,，如果您想了解Western blot的更多內(nèi)容或者其他服務(wù)信息,，您可以本公司的了解更多產(chǎn)品的詳細(xì)信息，至善至美的服務(wù)是我們永無止境的追求,，歡迎新老客戶放心選購自己心儀產(chǎn)品,，我們將竭誠為您服務(wù)！

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