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mercodia ELISA
mercodia ELISA標本必須為液體,，不含沉淀。包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。
◇ 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心,。
◇ 血漿：
應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心,。
◇ 尿液、胸腹水,、腦脊液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成,，應再次離心。
◇ 細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。
1.快速提取：15分鐘快速基因組DNA提取,，無需組織裂解試劑,，實驗過程無需調(diào)pH值、離心,；
2.快速分型擴增：45分鐘快速高效擴增,；
3.擴增試劑：分熱啟動型和非熱啟動型兩種，含有染料,，擴增后可直接電泳,；
4.減少繁瑣步驟，降低污染風險,；
5.高通量操作：可在PCR儀上批量處理樣本,；
6.擴增產(chǎn)物末端加A，且可進行下游酶切、測序等,；
7.節(jié)約成本,，提取+擴增，合計低于6元,。
屬進口分裝試劑盒類產(chǎn)品,。公司還有血清、細胞,、抗體,、細胞因子、實驗試劑,、移液器,、實驗耗材、實驗儀器及實驗技術服務等等產(chǎn)品,，歡迎新老客戶,。
小鼠尾靜脈采血，如何從全血中制備ELISA用血清,，有什么原則嗎,？
放4℃過夜，然后4℃離心,，取上清即可用于ELISA,。
細胞株
液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好,？
要冷藏?。∫驗橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,，其溶液的pH值會發(fā)生改變,，溶液往往變堿，某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。
細胞計數(shù)及存活測試
1,、原理：
(1)計算細胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù),。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers，每個chamber中細刻9個1mm2大正方形,，其中4個角落之正方形再細刻16個小格,，深度均為0.1mm。當chamber上方蓋上蓋玻片后,，每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時,，計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細胞數(shù)目，乘以稀釋倍數(shù),，再乘以104,，即為每ml中之細胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會滲入死細胞中而呈色,，而活細胞因細胞膜完整，染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料,，如果細胞不易吸收trypan blue，則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細胞活率：活細胞數(shù)/(活細胞數(shù)+死細胞數(shù))×100%,。計數(shù)應在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成，隨時間延長,，部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質(zhì)有很強的親和力,，用不含血清的稀釋液，可以使染色計數(shù)更為準確,。
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