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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

MolPure^® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit適用于生物制品樣本中殘留DNA檢測的前處理,。采用*的磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系,，可最大限度的分離純化樣本中的微量宿主細(xì)胞殘留DNA,。

該前處理試劑盒可與多種宿主細(xì)胞DNA殘留（qPCR法）檢測試劑盒配合使用,，包括CHO宿主細(xì)胞殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41301）,、HEK293宿主細(xì)胞殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41302）,、Vero宿主細(xì)胞殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41303）和E.coli殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41304）。

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸和保存方法

Part I組分室溫運(yùn)輸,，4℃可保存1年,，長期保存于-20℃。

Part II組分室溫運(yùn)輸,，室溫保存,，有效期1年。

Part Ⅲ 組分冰袋運(yùn)輸,，-20℃保存1年,。

注意事項(xiàng)

1. 注意觀察常溫保存溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季等室溫為低溫環(huán)境時），可37℃水浴至溶液澄清,，避免影響使用效果,。
2. 洗脫時可能存在磁珠殘留，吸取樣本時應(yīng)盡量避免吸入磁珠,。

3. 處理樣本及加樣時,，勤換槍頭,，避免交叉污染,。

4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作,。

5. 本產(chǎn)品僅作科研用途,！

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1. 自備設(shè)備和試劑：磁性分離架,、杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀或其他全自動化提取儀，水浴鍋或金屬浴,，離心機(jī),，漩渦振蕩器,，1.5 mL離心管，無水乙醇等,。
2. 首使用前,，在洗滌液A^*和洗滌液B*瓶中加入標(biāo)簽或說明書中注明體積的無水乙醇，充分混勻后使用,，并做好標(biāo)記,。每次使用后將瓶蓋蓋緊，以保持瓶中的乙醇含量,。

一,、手工提取操作方法

1. 樣本處理

a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本，可用1×PBS（pH=7.4）對樣本進(jìn)行適當(dāng)比例稀釋后提取（對樣本進(jìn)行稀釋是為了保證檢測的準(zhǔn)確性,，使樣本的檢測值在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi),，通常可考慮進(jìn)行100倍稀釋）,。

b. 待測樣本為干粉的,，可用ddH₂O將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。

c. 待測樣本為復(fù)雜背景基質(zhì)的,，可根據(jù)需要進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),，以確定合適的樣本稀釋倍數(shù),。

2. 取100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中,，加入100 μL裂解液，10 μL蛋白酶K,，渦旋混勻10 sec,。

 【注】：樣本蛋白濃度0-100 mg/mL，蛋白酶K用量為10 μL,，樣本蛋白濃度100-200 mg/mL,，蛋白酶K用量為20 μL。

3. 60℃孵育20 min,。

4. 孵育完成后,，加入400 μL結(jié)合液、9 μL糖原,、6 μL Poly A鉀鹽渦旋混勻,。  

5. 加入20 μL磁珠，渦旋混勻后,，放置10 min,，每隔3 min渦旋混勻10 sec。

 【注】：磁珠使用前需渦旋混勻,，保證磁珠*重懸,。在一次性加樣4-5次后，建議再次混勻后再行加樣。

6. 短暫離心后,，將離心管置于磁力架上靜置1-2 min,，待磁珠*吸附，小心吸出液體,。

7. 加入500 μL洗滌液A（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇）,，振蕩或渦旋混勻，確保磁珠分散,，離心管壁無聚集磁珠,。

8. 短暫離心后，將離心管置于磁力架上靜置1-2 min,，待磁珠*吸附,，小心吸取液體。

9. 加入500 μL洗滌液B（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇）,，振蕩或渦旋混勻,，確保磁珠分散，離心管壁無聚集磁珠,。

10.短暫離心后,，將離心管置于磁力架上靜置1-2 min，待磁珠*吸附,，小心吸取液體,。

11.為保證盡量吸出殘留液體，可將離心管快速離心10 sec后,，置于磁力架上用10 μL移液器吸出殘留液體,。

12.打開管蓋，室溫放置3 min直至乙醇*揮發(fā),。觀察到磁珠表面無反光或出現(xiàn)裂隙即表明乙醇已揮發(fā)*,。

13.將離心管從磁力架上取下，加入50-100 μL 65℃預(yù)熱的洗脫液,，振蕩混勻,，短暫離心后，65℃孵育5 min,，期間可振蕩混勻1次,。

14.短暫離心后，將離心管放置于磁力架上靜置2 min,，待磁珠*吸附,，小心將DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，保存于-20℃,，長期保存需放置于-80℃,。

二,、半自動化提取操作方法
配套自動化儀器使用，以杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀為例（如要配套其他主流自動化儀器使用,，程序可向翌圣生物科技（上海）股份有限公司獲?。?/span>

1. 樣本處理

a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本，可用1×PBS（pH=7.4）稀釋100倍或1,000倍后提取,。

b. 待測樣本為干粉的,，可用ddH₂O將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。

c. 待測樣本為復(fù)雜背景基質(zhì)的,，可根據(jù)需要進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),，以確定合適的樣本稀釋倍數(shù)。

2. 取100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中,，加入100 μL裂解液,，10 μL蛋白酶K，渦旋混勻10 sec,。

【注】：樣本蛋白濃度0-100 mg/mL,，蛋白酶K用量為10 μL，樣本蛋白濃度100-200 mg/mL,，蛋白酶K用量為20 μL,。

3. 60℃孵育20 min，即為預(yù)處理樣本,，待用,。

4. 按照下表向96孔深孔板中加入相應(yīng)試劑（以杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀為例）：

【注】：磁珠懸浮液使用前需在渦旋混勻儀上充分重懸或充分顛倒混勻，在一次性加樣4-5次后,，建議再次混勻后再行加樣,。

5. 按照提取儀的位置，正確安放上述96孔預(yù)裝板,，并放置96深孔磁棒套。

6. 運(yùn)行如下程序,，程序結(jié)束后,，將洗脫液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，溶液可置于-20℃短期保存,，-80℃長期保存,。

奧盛Auto-Pure32A的提取儀器的提取程序

HB220413