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產品簡介
| CAS | 9003-98-9 | 分子量 | 31 kDa |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 15 KU/ |
| 貨號 | 10607ES | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),制藥 |
| 主要用途 | 核酸內切酶 |
產品介紹
產品描述
脫氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I,，一種發(fā)現(xiàn)于多種細胞和組織的核酸內切酶，靶向切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,，產生5’端為磷酸基團,、3’端為羥基的多聚核苷酸，平均消化產物最小為多聚四核苷酸,。DNase可催化多種形式DNA,，如單鏈DNA、雙鏈DNA,，甚至染色質（其切割速率受組蛋白影響）,。最佳的工作范圍是pH7-8，DNase的活性依賴于Ca2+,，并可被二價金屬離子如Co 2+,，Mn2+，Zn2+等激活,。5 mM Ca2+可保護酶使其不被水解,。在Mg2+存在下，該酶可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點,；而在Mn2+存在的條件下,，可同時識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割。DNase I最早從胰腺中分離而來,，至今哺乳動物胰腺也是該酶的最主要的來源之一,。
本品來自牛胰腺,，由四種色譜區(qū)分的組分A，B,，C,，D構成，摩爾比為4:1:1,，而D組分非常少,。分子生物學實驗中常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使標記堿基插入DNA,。本品以含氯化鈣的凍干粉形式供應,，酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。
產品性質
CAS號（CAS NO.） | 9003-98-9 |
分子量（Molecular Weight） | ~31 kDa |
孔尼茨單位（Kunitz Units） | ≥2000 Kunitz Units/mg protein |
類型（Type） | Type IV |
最佳PH（Optimal pH） | 7～8 |
外觀（Appearance） | 白色至淺褐色凍干粉 |
純度（Purity） | Protein:≥80% by Biuret |
溶解性（Solubility） | 0.15 M NaCl：5 mg/mL,，無色透明溶液 |
激活劑（Activators） | 多種二價金屬離子如Mg2+,、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+ |
抑制劑（Inhibitors） | β-巰基乙醇；螯合劑,；SDS,；肌動蛋白 |
活力單位定義（Unit Definition） | 25℃，pH5.0條件下DNase催化底物DNA,，使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個酶活力單位（Kunitz unit）,。 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。凍干粉末于-20℃保存,，有效期2年,。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
2）本產品僅作科研用途,！
DNase Ⅰ儲存溶液
20 mM sodium acetate（pH 6.5），5 mM CaCl2,，0.1 mM PMSF,，50%甘油。
DNase Ⅰ失活或抑制
加入EDTA至終濃度為2.5 mM后,，65℃加熱10 min可使DNase Ⅰ失活,。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑,，達到毫摩爾/升濃度的鋅離子,，0.1%的SDS，DTT,、巰基乙醇等還原劑,，50-100 mM以上鹽濃度均對DNase Ⅰ有顯著抑制作用。
使用方法（應用于蛋白提取實驗,，僅供參考）
1）反應體系：蛋白提取液中按照1/100體積加入DNase I儲存液（使其終濃度為20 U/mL）,，1/100體積加入1 M MgCl2,。
2）反應條件：37℃，30-60 min,。繼續(xù)后續(xù)蛋白提取實驗即可,。
【注】由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA,，否則會降低DNase I的消化能力,。
HB21081
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