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  • 一文教你了解和選擇蛋白酶K

    蛋白酶K的概念和作用ProteinaseK(蛋白酶K)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,其相對分子量約為29.3kDa,,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,。ProteinaseK應(yīng)用廣泛,,可用于制備脈沖電泳的染色體DNA,,蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實(shí)驗(yàn),,而變性劑如SDS(1%)可提高其活性。蛋白酶K的特點(diǎn)源于基因重組酵母菌株,;不含RNase和DNase;在尿素和SDS中活性穩(wěn)定存在,;在較廣的pH范圍內(nèi)(pH4.0–12.0)均有活性,,最佳pH范圍為pH7.5-9.
  • 恒溫擴(kuò)增技術(shù),,分子診斷POCT新方向

    近年來,,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展,基于核酸檢測的診斷方法已大量建立并廣泛應(yīng)用于人類疾病的實(shí)驗(yàn)室檢測中,。與其他的核酸擴(kuò)增技術(shù)相比,,等溫擴(kuò)增有快速、高效,、特異的優(yōu)點(diǎn)且無需專用的設(shè)備,,所以它一經(jīng)出現(xiàn)就被許多學(xué)者認(rèn)為是一種有可能與PCR媲美的檢測方法。因此,,相信恒溫擴(kuò)增技術(shù)為基礎(chǔ)的診斷儀器和試劑盒的開發(fā)和應(yīng)用將會是未來分子診斷POCT的一個新方向,。主流恒溫擴(kuò)增技術(shù)原理介紹1、LAMP環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)原理:環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(loopmediatedisothermalamplification,LAM
  • 一文教你如何使用基因轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑-聚凝胺(Polybrene)來提高轉(zhuǎn)染效率

    Polybrene,,也稱為HexadimethrineBromide,,是一種多聚陽離子聚合物,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,。它主要用作基因轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑,,尤其是在逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染中。Polybrene的作用機(jī)理可能是通過中和細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥,,從而促進(jìn)病毒顆粒與細(xì)胞的吸附作用,。圖1.聚凝胺(Polybrene)結(jié)構(gòu)式在病毒介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染中,它能顯著提高慢病毒和腺病毒等對哺乳動物細(xì)胞的感染效率,。此外,,Polybrene在DNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中也能增強(qiáng)脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率,為基因
  • 干貨 | 基因編輯探秘系列之產(chǎn)品選購指南

    自2012年亮相以來,,CRISPR技術(shù)已在基因功能研究,、藥物靶點(diǎn)篩選、遺傳疾病治療,、癌癥研究以及作物育種等多個領(lǐng)域取得突破性成果,。其工作機(jī)制如下:Cas蛋白(例如廣泛使用的Cas9)在向?qū)NA(gRNA)的引導(dǎo)下能夠精準(zhǔn)地定位到特定的DNA序列上。一旦到達(dá)目標(biāo)位置,,Cas9會與DNA結(jié)合并切割其雙鏈,,從而產(chǎn)生一個雙鏈斷裂(DSB)。面對這樣的損傷,,細(xì)胞會激活自身的修復(fù)機(jī)制來應(yīng)對,,主要包括非同源末端連接(NHEJ)或同源重組修復(fù)(HDR)兩種方式。利用這些天然存在的DNA修復(fù)過程,,科學(xué)家可以在目
  • 上新 | 做克隆,更省心,!

    鏘鏘鏘,!親愛的科研小伙伴們,翌圣明星產(chǎn)品——一步法快速克隆試劑盒上新組合套裝啦,!克隆試劑盒搭配LBPowder預(yù)混培養(yǎng)基,!這對“黃金搭檔”將讓你的實(shí)驗(yàn)更加順利,、高效,!為什么選擇這個組合,?01告別繁瑣,,輕松完成克隆實(shí)驗(yàn)簡化流程:克隆試劑盒與LBPowder的搭配使用,,極大地簡化了實(shí)驗(yàn)流程,。1-7片段連接一步搞定,培養(yǎng)基配制不再需要準(zhǔn)備多種試劑稱量,、配制、分裝,。減少誤差:一站式解決方案減少了因操作復(fù)雜帶來的潛在誤差,,確保每一步都更加精準(zhǔn),,實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠。02實(shí)驗(yàn)結(jié)果更穩(wěn)定高品質(zhì):克隆試劑盒連接效率
  • 試用,!GMP級細(xì)胞因子重組人IL-3和人bFGF重磅上市!

    01前言以免疫細(xì)胞和干細(xì)胞為代表的細(xì)胞療法,,在越來越多種疾病的臨床應(yīng)用中顯示出有效的作用,,因其高度精準(zhǔn)化和個性化的優(yōu)勢,已成為未來人類醫(yī)學(xué)發(fā)展的熱門方向,。干細(xì)胞和免疫細(xì)胞治療已被寫入我國《“十四五”醫(yī)藥工業(yè)發(fā)展規(guī)劃指南》,。目前越來越多的人開始關(guān)注細(xì)胞治療領(lǐng)域。幾乎所有的細(xì)胞治療都有一個共同點(diǎn),,都需要使用細(xì)胞因子來誘導(dǎo)細(xì)胞增殖或分化,。細(xì)胞因子是細(xì)胞治療藥物生產(chǎn)的關(guān)鍵原材料。為了能夠獲得高質(zhì)量和性能穩(wěn)定的免疫細(xì)胞和干細(xì)胞,,確保治療的安全性,,對添加的原料必須有嚴(yán)格的質(zhì)量要求,,細(xì)胞療法研發(fā)人員通常選用G
  • UCF.ME® rTEV蛋白酶:無殘留精準(zhǔn)切除蛋白標(biāo)簽的高效解決方案

    隨著蛋白質(zhì)科學(xué)的飛速發(fā)展,蛋白純化技術(shù)在生物研究領(lǐng)域和生物技術(shù)工業(yè)中的重要性日益凸顯,。這一核心技術(shù)涉及利用基因工程方法,,將目標(biāo)蛋白的編碼信息整合入宿主細(xì)胞,,從而誘導(dǎo)它們高效地生產(chǎn)所需蛋白,。隨后,,通過一系列精細(xì)的體外操作步驟實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)的高純度提取,。蛋白純化使得科學(xué)家能分離出單一類型的蛋白質(zhì),,這對于深入研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能、開發(fā)新藥,、進(jìn)行疾病診斷以及推動生物技術(shù)的應(yīng)用至關(guān)重要,。該技術(shù)不僅確保了科學(xué)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,,還為生命科學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展提供了持續(xù)的動力。圖1.親和層析原理圖[1]在蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域,,融
  • 宿主gDNA,、試劑背景核酸污染去除只需一款Thermolabile dsDNase,!

    蛋白純度≥99%,65℃加熱10min即可快速失活,,對樣品中RNA無影響,。在診斷或研究由病原感染引起的疾病時,當(dāng)前的檢測方法大多針對病原體的基因組進(jìn)行診斷,。然而,,僅依靠檢測病原體的基因組核酸只能確認(rèn)病毒的存在,不足以反映持續(xù)感染或整合入宿主基因組的風(fēng)險,。例如,人乳頭瘤病毒(HPV)DNA的檢出可能只是一次性感染,,不代表持續(xù)病變或癌變風(fēng)險,。相反,檢測HPVE6/E7mRNA水平能提供更精確信息,評估HPV在宿主體內(nèi)的基因組整合,、轉(zhuǎn)錄活性及持續(xù)感染和致癌可能性,。這種方法更關(guān)注“病變”而非僅僅是“感染
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