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MolPure®核酸提取系列產品，更多選擇,，更高質量
核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,，為生命的基本物質之一。核酸廣泛存在于所有動植物細胞,、微生物內,，并且常與蛋白質結合形成核蛋白。核酸提取是分子生物學實驗中基礎的實驗之一,，幾乎所有的分子生物學實驗上游都需要用到核酸提取,。
核酸提取方法
核酸提取包含裂解和純化兩大步驟，裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程,。通過使蛋白質變性,，破壞膜結構及解開與核酸相連接的蛋白質，從而實現(xiàn)核酸游離在裂解體系中,。裂解體系中還可能加入蛋白酶,，利用蛋白酶將蛋白質消化成小的片段，促進核酸與蛋白質的分開,，同時,，也便于后面的純化操作以及獲得更純的核酸。
表1. 核酸提取常見裂解方式
裂解方法 | 原理 | 應用 | 適用樣本 |
CTAB法 | 一種陽離子去污劑,，可溶解細胞膜,，并與核酸形成復合物。該復合物在高鹽溶液中可溶,，通過有機溶劑抽提,，去除蛋白、多糖,、酚類等雜質后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來,。 | DNA、RNA提取 | 植物組織、真菌等 |
SDS法 | 一種陰離子去污劑,，可促使細胞裂解,，使染色體離析、蛋白質變性,，釋放出核酸,。 | DNA提取、質粒提取 | 適用于大部分實驗材料,，如血液,、細胞、動物組織,、細菌,、酵母等 |
胍鹽法 | 胍鹽是蛋白強變性劑，采用高濃度的胍鹽裂解細胞,，促使核蛋白體解離,，同時使細胞內核酸酶失活，避免釋放出的核酸被降解,。 | DNA,、RNA提取 | 適用于各類動物組織、培養(yǎng)細胞,、次生代謝物較少的植物組織 |
純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分,，如蛋白質、鹽及其它雜質*分離的過程,。常見的純化方式有：有機溶劑抽提,、硅膠質吸附（柱式法）、磁珠吸附3種,。第—種方法是利用有機溶劑對裂解體系進行反復抽提以去除蛋白等雜質,；再用醇將核酸沉淀下來，實現(xiàn)核酸與鹽的分離,。第二種和第三種方法都是利用某些固相介質,，在某些特定的條件下，選擇性地吸附核酸,，而不吸附蛋白質及鹽的特點,，實現(xiàn)核酸與蛋白質及鹽的分離。
核酸提取的原則
- 保證核酸一級結構的完整性
- 排除其它核酸分子的污染（如提取DNA時排除RNA的干擾）
- 核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和高濃度的金屬離子
- 盡可能降低蛋白質,、多糖和脂類等大分子物質污染
MolPure®系列試劑盒,，理想的核酸提取產品！
MolPure®柱式核酸提取系列試劑盒采用MolPure® DNA/RNA Column和新型的溶液體系,，適用于從各種反應體系樣品,、多種動植物樣本,、菌體等復雜樣本中高效提取和純化高純度、高質量的核酸,。大部分試劑盒提取過程不需要用到有毒的酚、lv仿等有機物抽提,，也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀,，操作簡便，具有高效,、快速,、環(huán)保等特點。升級版的離心柱能高效結合核酸,，不吸附蛋白質,、多糖、脂類及其它非核酸類物質,，提取的核酸純度高,，可直接用于各種分子生物學實驗。
產品類型
產品性能
1.MolPure Cell/Tissue DNA Kit 細胞/組織DNA提取試劑盒 18700ES
產品特點
- 得率高：產量高達40 µg
- DNA純度高：無蛋白質和RNA污染,，可直接用于PCR,、酶切和雜交等實驗
- 快速簡便：操作過程1 h完成
- 安全環(huán)保：無需使用酚lv仿等有機物抽提
圖1：小鼠組織DNA提取瓊脂糖膠圖，18700提取產量優(yōu)于T公司同類產品
2.MolPure Plant DNA Kit 植物DNA提取試劑盒 18800ES
產品特點
- 樣本范圍廣：適用于普通植物,、低含量多糖多酚類植物,、細胞、真菌樣品
- DNA純度高：OD260/OD280比值可達1.7～1.9,，可直接用于PCR,、酶切和雜交等實驗
- 得率高：產量高達30 μg
- 安全環(huán)保：無需使用酚lv仿等有機物抽提
圖2：擬南芥、楊樹葉片DNA提取瓊脂糖膠圖,，18800提取產量優(yōu)于T公司同類產品
3.MolPure Gel Extraction Kit 瓊脂糖凝膠回收試劑盒 19101ES
產品特點
- 回收DNA長度范圍廣：50 bp-15 kb
- 操作簡便：15 min即可完成純化
- 回收率高：回收率>60%,，高達90%
圖3：500 bp/1 kb PCR產物瓊脂糖凝膠回收膠圖，19101回收效率略優(yōu)于T公司同類產品,。
4.MolPure Plasmid Mini Kit 質粒小量提取試劑盒 19001ES
產品特點
- 質粒提取得率高：升級版離心柱,，可吸附30 μg質粒DNA
- 質粒純度高：可直接用于酶切、轉化,、測序等實驗
- 安全環(huán)保：無需使用酚lv仿等有機物抽提
圖4：PUC19,、40 kb質粒提取結果膠圖，19001提取質量不亞于進口品牌T公司同類產品,。
常見問答
DNA提取常見問題：
常見問題 | 可能原因 | 解決方法 |
DNA產量低 | 處理材料過量或者裂解不* | 使用適量的起始材料,，充分研磨或者勻漿 |
RNA殘留 | 樣品RNA含量太豐富 | 提高RNase A處理濃度 |
未提取到DNA | 漂洗液中忘記加無水乙醇 | 第—次實驗時，在Wash Buffer*中加入量無水乙醇 |
離心柱堵塞 | 研磨裂解不充分,，團塊多,；裂解物太粘稠；離心力太小 | 在裂解后添加一步離心以去除雜塊；減低起始材料量,，不要處理過量,；加大離心力 |
洗脫的DNA溶液帶顏色或者膜上有明顯的色素殘留 | 漂洗次數(shù)不夠 | 漂洗完成后，加500 μL乙醇再漂洗一遍,。 |
起始材料太多過量 | 減少起始處理材料,，不要過量 | |
洗脫下來的DNA產量低 | 離心柱殘留有較多乙醇或者底部不慎沾有乙醇 | 確保做了空柱離心步驟，否則殘留乙醇會影響洗脫效率 |
洗脫緩沖液量偏低 | 使用100-200 μL Elution Buffer洗脫 | |
A260吸光值異常偏高 | 一些硅基質膜成分一起洗脫下來,，干擾了吸光值 | 將洗脫的基因組DNA溶液13,000 rpm離心1 min,，小心取上清使用 |
DNA下游酶切不能切開或者酶切不* | 離心柱殘留有較多乙醇或者底部不慎沾有乙醇抑制了酶切反應 | 確保做了空柱離心，然后空氣中晾幾分鐘,，讓殘留乙醇揮發(fā) |
RNA提取常見問題：
常見問題 | 可能原因 | 解決方法 |
提取不到RNA或者RNA產量低 | 漂洗液中沒有添加正確體積的無水乙醇 | 按照說明書在試劑盒使用前,，添加正確體積的無水乙醇并混勻 |
樣本保存不當或樣本保存時間過久 | 樣本保存于-80℃或凍存于液氮中，并避免反復凍融使用,；盡量采用新鮮組織或培養(yǎng)的細胞進行RNA提取操作 | |
樣本裂解不充分 | 在組織勻漿時,，請保證組織充分勻漿，組織細胞都被充分裂解釋放RNA | |
樣本用量不合適 | 按說明書建議量添加樣品用量及裂解液,，樣品添加過多會導致RNA提取量降低 | |
洗脫液添加不正確 | 確認RNase-free H2O添加到了MolPure® RNA Column中央位置 | |
洗脫體積不合適或洗脫不* | 洗脫液體積為100 μL為佳,；若洗脫效果不理想，建議RNase-free H2O預熱后加入,，延長室溫放置時間 | |
吸附柱中有漂洗液洗滌后的乙醇殘留 | 如果洗滌后空柱離心1 min仍有乙醇殘留,，可以將空柱離心操作的時間增加至2 min，或將MolPure® RNA Column室溫晾置5 min,，以充分除去殘留乙醇 | |
獲得的RNA有降解 | 組織樣本沒有及時保存 | 組織樣本或者細胞在收集后若不及時使用,，請立即低溫保存于-80℃或者液氮中；提取RNA請盡量使用新近采集的組織或細胞樣本 |
組織樣本反復凍融 | 組織樣本保存時,，切成小塊保存,，使用時取出其中一塊即可，避免樣本的反復凍融導致RNA的降解 | |
操作間有RNase引入或沒有佩戴一次性手套,、口///罩等 | RNA提取實驗在單獨的RNA操作間進行,，并在實驗前清理好實驗桌，實驗時佩戴一次性手套,、口///罩,，///大程度上避免RNase引入導致的RNA降解 | |
試劑在使用過程中被RNase污染 | 更換新的配套試劑進行相關實驗 | |
RNA操作時所用的離心管、槍頭等有RNase污染 | 確認RNA提取時所用到的離心管,、槍頭,、移液器等都是RNase-free級別 | |
獲得的RNA影響下游實驗 | 洗脫后的RNA有鹽離子殘留 | 確認漂洗液中添加了正確體積的乙醇，并進行2次柱洗滌,；如果還有鹽離子殘留,，在MolPure® RNA Column漂洗后,，室溫放置5 min后再進行離心操作，以///大程度上去除鹽離子污染 |
洗脫后的RNA有乙醇殘留 | 確認漂洗液洗滌后,，有進行空柱離心操作,；若還有乙醇殘留，可以將空柱離心時間增加至2 min,，或者在空柱離心后室溫晾置5 min,，以///大程度上去除乙醇殘留 |
產品訂購
產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格（元） | *（元） |
MolPure PCR Purification Kit PCR產物純化試劑盒 | 19106ES50/70 | 50/200T | 233/573 | 159/399 |
MolPure Gel Extraction Kit 瓊脂糖凝膠回收試劑盒 | 19101ES50/70 | 50/200T | 263/573 | 189/399 |
MolPure Plasmid Mini Kit 質粒小量提取試劑盒 | 19001ES50/70 | 50/200T | 183/573 | 129/399 |
MolPure Endo-free Plasmid Maxi Kit 無內毒素質粒大量提取試劑盒 | 19036ES10 | 10T | 973 | 679 |
MolPure Cell/Tissue DNA Kit 細胞/組織DNA提取試劑盒 | 18700ES50/70 | 50/200T | 413/1483 | 289/1039 |
MolPure Plant DNA Kit 植物DNA提取試劑盒 | 18800ES08/20/50 | 5T/50/200T | 100/513/1653 | 70/359/1159 |
MolPure TRIeasy Plus Total RNA Kit 總RNA提取試劑盒(帶離心柱） | 19211ES60 | 100T | 1293 | 909 |
MolPure Cell/Tissue Total RNA Kit 細胞/組織總RNA提取試劑盒 | 19221ES08/50 | 5T/50T | 133/893 | 89/629 |
MolPure Plant RNA Kit 植物RNA提取試劑盒 | 19291ES08/50 | 5T/50T | 170/873 | 119/609 |
MolPure Cell/Tissue miRNA Kit 細胞/組織miRNA提取試劑盒 | 19331ES50 | 50T | 2353 | 1649 |
更多產品敬請期待，持續(xù)上新中~
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