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EdU系列熒光檢測(cè)產(chǎn)品
------點(diǎn)亮你的視野,！
想做細(xì)胞增殖,、細(xì)胞成像、流式分析、細(xì)胞示蹤,、DNA損傷修復(fù),、病毒增殖活性檢測(cè)觀察怎么辦,？
免疫法,、染料法、同位素法……
免疫法的抗體太貴,、染料法染色不清晰,、同位素法太危險(xiǎn)……
小翊來(lái)幫您，全新EdU系列熒光探針,，點(diǎn)亮你的視野,，讓你看的更清晰！
>>>背景介紹
測(cè)定DNA合成情況是細(xì)胞增殖,、細(xì)胞周期,、細(xì)胞毒性、DNA復(fù)制及修復(fù),、信號(hào)通路等研究方向常用方法之一,，用到的檢測(cè)試劑主要是胸腺嘧啶核苷酸類(lèi)似物（BrdU、EdU）,，兩種試劑在檢測(cè)方面有一些不同之處,。BrdU免疫檢測(cè)需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，而EdU因?yàn)槠?的炔羥基團(tuán)可以與一些熒光染料發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng),，無(wú)需變形,，從而將細(xì)胞標(biāo)記上熒光，因此應(yīng)用更廣泛,。
EdU 檢測(cè)增殖細(xì)胞的特點(diǎn)及原理
EdU（５‐ethynyl‐２′‐deoxyuridine,，５‐乙.炔基‐２′脫氧尿嘧啶核苷）也是一種胸腺嘧啶核苷的類(lèi)似物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是脫氧胸腺嘧啶環(huán)上與５位C原子相連的甲基被乙.炔基取代,，在S期細(xì)胞增殖時(shí)可作為底物摻入到正在復(fù)制的DNA鏈中,。
EdU在細(xì)胞增殖時(shí)能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,，基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù),。熒光染料可以同EdU發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)（點(diǎn)擊法）,，從而將增殖的細(xì)胞標(biāo)記上熒光?？捎糜诩?xì)胞成像,、流式、細(xì)胞示蹤,、DNA損傷修復(fù)檢測(cè),、線(xiàn)粒體活性檢測(cè)以及病毒增殖活性檢測(cè)等，EdU亦適用于活體注射,，穩(wěn)定,，對(duì)活體*。
與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比,，EdU檢測(cè)法更簡(jiǎn)單,、更快速、更準(zhǔn)確,，不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解,、熱解、酶解)處理,，有效地避免了樣品損傷,，有助于在組織、器官的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的情況,，具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度,。
圖1：EdU滲入DNA分子過(guò)程
>>>什么是“點(diǎn)擊法”
基于EdU的點(diǎn)擊法標(biāo)記技術(shù)是由銅催化的疊氮化物-炔烴環(huán)加成反應(yīng)（圖2），將其應(yīng)用于細(xì)胞的原位標(biāo)記需兩步過(guò)程,。首先,，其中一個(gè)生物反應(yīng)配體是由疊氮化物或炔烴與“構(gòu)件”（如核苷酸，核苷,，氨基酸,，單糖或脂肪酸）連接構(gòu)成；隨后將另一是由熒光染料,、生物素或其他檢測(cè)試劑連接的互補(bǔ)炔烴或疊氮化物構(gòu)成的反應(yīng)配體在催化劑銅的存在條件下“點(diǎn)擊”到位,，完成反應(yīng)
點(diǎn)擊化學(xué)與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測(cè)法不同，EdU點(diǎn)擊檢測(cè)法不是基于抗體,，無(wú)需DNA變性即可檢測(cè)摻入的核苷,。EdU點(diǎn)擊檢測(cè)法可以與R-PE、GFP等熒光蛋白復(fù)用提力,，該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于化學(xué)方面*的小分子和低背景的標(biāo)記物以及檢測(cè)基團(tuán)之間特異性共價(jià)反應(yīng),。小分子的疊氮化物試劑可以有效地接觸DNA而無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破壞處理。進(jìn)而簡(jiǎn)化了測(cè)定流程并且獲得的結(jié)果與使用傳統(tǒng)的BrdU相似或更好
圖2：Click-iT EdU點(diǎn)擊法檢測(cè)核酸過(guò)程
>>>EdU系列產(chǎn)品特點(diǎn)
熒光染料可以在銅離子催化下同EdU發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)，將增細(xì)胞標(biāo)記上相關(guān)的熒光,?？捎糜诩?xì)胞成像、流式,、細(xì)胞示蹤,、DNA損傷修復(fù)檢測(cè)以及病毒增殖活性檢測(cè)等，EdU亦適用于活體注射,，穩(wěn)定,，對(duì)活體*。
EdU檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)：
- — 僅需EdU孵育,；細(xì)胞固定化,；熒光檢測(cè)三步；
- — 不到3h完成檢測(cè),；
- — 標(biāo)記率高且無(wú)需變性,，更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)；
- — 允許與多種抗體,、熒光染料同時(shí)標(biāo)記,；
- — 細(xì)胞成像、流式,、細(xì)胞示蹤,、DNA損傷修復(fù)檢測(cè)、病毒增殖活性檢測(cè)等,。
>>>EdU系列產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果
1,、Click-iT EdU熒光成像觀察（綠色、紅色,、遠(yuǎn)紅色）
2,、Click-iT EdU流式細(xì)胞儀觀察（綠色、紅色,、遠(yuǎn)紅色）
>>>相關(guān)產(chǎn)品
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) |
|---|---|---|---|
Supfluor 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells Supfluor 488 Caspase-3活細(xì)胞分析試劑盒 | 40273ES25/60 | 25/100T | 783/2583 |
Live & Dead Bacterial staining kit 活細(xì)菌/死細(xì)菌染色試劑盒 | 40274ES60 | 100T | 3683 |
Yefluor 488 EdU Imaging Kits Yefluor 488 EdU 細(xì)胞成像試劑盒（綠色熒光） | 40275ES60/76/80 | 100/500/1000T | 1583/3183/4983 |
Yefluor 594 EdU Imaging Kits Yefluor 594 EdU 細(xì)胞成像試劑盒（紅色熒光） | 40276ES60/76/80 | 100/500/1000T | 1583/3183/5383 |
Yefluor 647 EdU Imaging Kits Yefluor 647 EdU細(xì)胞成像試劑盒（遠(yuǎn)紅外色熒光） | 40277ES60/76/80 | 100/500/1000T | 1583/3183/5383 |
Yefluor 488 EdU Flow Cytometry Assay Kits Yefluor 488 EdU 細(xì)胞流式試驗(yàn)試劑盒（綠色熒光） | 40278ES25/50 | 20/50T | 2583/5783 |
Yefluor 594 EdU Flow Cytometry Assay Kits Yefluor 594 EdU 細(xì)胞流式試驗(yàn)試劑盒（紅色熒光） | 40279ES25/50 | 20/50T | 2583/5783 |
Yefluor 647 EdU Flow Cytometry Assay Kits Yefluor 647 EdU 細(xì)胞流式試驗(yàn)試劑盒（遠(yuǎn)紅外色熒光） | 40280ES25/50 | 20/50T | 2583/5783 |
| 5‐ethynyl‐2′‐deoxyuridine (EdU) 5‐乙.炔基‐2′脫氧尿嘧啶核苷 | 40284ES05 | 2mg | 1783 |
Yefluor 488 EdU Kits（植物細(xì)胞） Yefluor 488 EdU 植物細(xì)胞染色試劑盒 | 40287ES60 | 100T | 1583 |
Yefluor 647 EdU Kits（植物細(xì)胞） Yefluor 647 EdU 植物細(xì)胞染色試劑盒 | 40288ES60 | 100T | 1583 |
參考資料
1. Chehrehasa F, Meedeniya AC, Dwyer P, Abrahamsen G, Mackay-Sim A. EdU, a new thymidine analogue for labelling proliferating cells in the nervous system. J. Neurosci. Methods. February 2009, 177 (1): 122–30. PMID 18996411. doi:10.1016/j.jneumeth.2008.10.006.
2.Cavanagh, Brenton; Walker, T. Norazit, A. Meedeniya, A. C. Thymidine analogues for tracking DNA synthesis.. Molecules. September 2011 15, 16 (9): 7980–93. PMID 21921870.
3.羅濤, 王彤敏, 李力燕. EdU與BrdU在檢測(cè)細(xì)胞增殖中的特點(diǎn)及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 重慶醫(yī)學(xué), 2015(32).
