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Hieff NGS® MaxUp II Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina
——兼容常規(guī)與鏈特異性mRNA文庫構(gòu)建
背景簡介
RNA被認(rèn)為是生物信息傳遞的“橋梁”。而轉(zhuǎn)錄組測序可利用NGS技術(shù)對(duì)組織或者細(xì)胞中的RNA反轉(zhuǎn)錄之后的cDNA文庫測序,，通過分析可計(jì)算不同RNA的表達(dá)量,、發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)錄本,、進(jìn)行轉(zhuǎn)錄本定位、分析可變剪切,、檢測基因融合等,，提供全面的轉(zhuǎn)錄組信息,。
圖 遺傳學(xué)中心法則
目前主流的mRNA建庫主要流程是mRNA純化，mRNA逆轉(zhuǎn)錄,，雙鏈cDNA合成,，末端修復(fù)，A尾添加,，接頭連接,，純化/分選，文庫擴(kuò)增,，時(shí)間上需要1.5 d甚至更久,。
翊圣生物結(jié)合自身多年的分子酶創(chuàng)新研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，推出升級(jí)版快速mRNA建庫試劑盒,，可在短的時(shí)間進(jìn)行高效建庫,。助力獲得優(yōu)異的轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)。
亮點(diǎn)一覽
1,、建庫快速：完整建庫比主流方法縮減1.5-2 h,，1 d內(nèi)獲得高質(zhì)量文庫。
圖 升級(jí)版建庫試劑盒建庫流程
2,、兼容常規(guī)與鏈特異性文庫構(gòu)建
本產(chǎn)品搭配兩種二鏈合成buffer,，即含dNTP（常規(guī)建庫）與dUTP（鏈特異性建庫），可兼容兩種模式的mRNA文庫構(gòu)建,。一個(gè)盒子兩種用處，不用再額外備貨,。
3,、高效逆轉(zhuǎn)錄酶，更適合復(fù)雜模板
RNaseH能特異的降解RNA-DNA雜交分子中RNA的特性,，將RNA降解成小片段,，影響反轉(zhuǎn)錄效率。YEASEN提供的第四代Hifair逆轉(zhuǎn)錄酶,，去除RNase H活性,，同時(shí)溫度的耐受性高達(dá)65℃，有利于復(fù)雜RNA模板二級(jí)結(jié)構(gòu)的打開,，更利于逆轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行,。
硬核支撐
以1 μg的標(biāo)準(zhǔn)品RNA（Agilent#740000）為起始，分別構(gòu)建鏈特異性文庫和非鏈特異性文庫,，質(zhì)控后的文庫用illumina Hiseq X-10 PE150測序,。
- 優(yōu)異的測序質(zhì)量
- 表達(dá)重復(fù)性高
- 優(yōu)異的文庫均一性
- rRNA殘留更低，有用數(shù)據(jù)更多
- 鏈特異性建庫：98.5%的Reads比對(duì)到正義鏈上
客戶案例
單位：廣州某生物公司J*
樣本：草莓,，油菜,，核盤菌
結(jié)論：高質(zhì)量文庫,，優(yōu)異的測序數(shù)據(jù)
- 文庫報(bào)告
- 測序質(zhì)量
- 數(shù)據(jù)比對(duì)
- 數(shù)據(jù)分布
- 基因覆蓋度分析
單位：上海某生物公司O*
樣本：人，大鼠,，西瓜
結(jié)論：高質(zhì)量文庫,，優(yōu)異的測序數(shù)據(jù)
- 建庫報(bào)告
- 測序質(zhì)量
- 數(shù)據(jù)比對(duì)
- 數(shù)據(jù)分布
- 基因覆蓋度分析
相關(guān)產(chǎn)品：
| 類型 | 名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 建庫試劑盒 | Hieff NGS® MaxUpⅡ Dual mode mRNA Library Prep Kit for Illumina® | 12300ES24/96 | 24/96 T |
| mRNA富集磁珠 | Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit | 12603ES24/96 | 24/96 T |
| rRNA去除試劑盒 | Hieff NGS® MaxUp rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat) | 12253ES24/96 | 24/96 T |
| RNA純化磁珠 | Hieff NGS® RNA Cleaner | 12602ES56/75 | 60/450 mL |
