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翊圣生物提供高成功率糖尿病建模用STZ：純度≥98%（HPLC測(cè)定）。
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | *（元） |
Streptozocin 鏈脲佐菌素 | 60256ES60 | 100mg | 156.00 |
Streptozocin 鏈脲佐菌素 | 60256ES76 | 500mg | 386.00 |
Streptozocin 鏈脲佐菌素 | 60256ES80 | 1g | 676.00 |
文章包含以下知識(shí)點(diǎn)
1. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)SOP
2. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型建模效果評(píng)估指標(biāo)
3. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的失敗原因解析
4. STZ誘導(dǎo)小/大鼠死亡率高的原因解析
5. 糖尿病建模的影響因素
6. STZ建模方法思路梳理
7. 高建模成功率STZ使用指南
絕大多數(shù)由化學(xué)藥物誘導(dǎo)的動(dòng)物疾病模型具備標(biāo)準(zhǔn)化思路,，是用一定劑量的某種化學(xué)藥物借助某種手段抵達(dá)正常組織/器官,，并在處理一段時(shí)間后評(píng)估疾病指標(biāo)。下面就從幾個(gè)方面梳理建立鏈脲佐菌素（Streptozocin,，STZ）誘導(dǎo)的糖尿病疾病模型的思路,。
1.STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)SOP
1.1 動(dòng)物的準(zhǔn)備
盡量選用雄性動(dòng)物，雌性含有激素影響建模效率,。有研究顯示,，雌性動(dòng)物成模率差，而且可能會(huì)比雄性出現(xiàn)更高死亡率,，尤其是I型,。
I型糖尿病（Type I diabetes）一般按照體重選擇即可,，推薦大鼠170-200g,，小鼠17-22g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1~2周后空腹注射STZ,，成模率相對(duì)理想,。
II型糖尿病（Type II diabetes）對(duì)于大鼠（比如SD/Wistar）,，選取4-5周齡,，體重在90-100g，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達(dá)240-280g,。 對(duì)于小鼠（比如C57/ICR/昆明小鼠）,，選取4-5周齡，體重在16-20g,，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達(dá)30-35g,。 對(duì)于新購(gòu)入動(dòng)物或更換飼養(yǎng)環(huán)境需要先用普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，然后再選擇適合周齡/體重動(dòng)物轉(zhuǎn)用高脂高糖飼料繼續(xù)喂養(yǎng)。從模型建立成功率來(lái)看,，大鼠推薦用SD,，小鼠推薦C57。
1.2 造模前的喂養(yǎng)
造膜前的喂養(yǎng),，Ⅰ型糖尿病模型成模比較快,，通常大鼠在普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后即可開(kāi)始造模；Ⅱ型糖尿病模型：高脂飲食誘導(dǎo)加小劑量STZ,。造模前喂以高脂(高糖)飼料,，誘發(fā)出胰島素抵抗。
1.3 試劑的準(zhǔn)備
①高脂(高糖)飼料
高脂(高糖)飼料成分：其中含10%蔗糖,，10%豬油,，5%膽固醇
由基礎(chǔ)鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按質(zhì)量比搭配制作高脂高糖飼料：其比例為豬油18 % ,蔗糖20 % ,蛋黃3 % ,基礎(chǔ)飼料59 %,。
②STZ溶劑——檸檬酸鈉緩沖液的配制
A液和B液的配制：稱取檸檬酸(FW:210.14) 2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液,；稱取檸檬酸鈉(FW:294.10) 2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液。
檸檬酸鈉緩沖液的配制：將A,、B液按一定比例混合（1：1.32也有按1:1的）,，pH計(jì)測(cè)定pH值，調(diào)節(jié)pH值到4.2-4.5,，即是所需檸檬酸鈉緩沖液,。
1.4 注射前準(zhǔn)備
配制STZ注射液前，STZ凍干粉放置于干燥滅菌瓶?jī)?nèi),，外用鋁箔紙或錫紙包好,，與檸檬酸鈉緩沖液一起置于冰浴預(yù)冷，帶到動(dòng)物房備用,。
注意：STZ凍干粉從−20°C冰箱取出后,，于室溫干燥避光放置10min左右，使其*解凍（很重要）,。
1.5 配制注射液
大鼠過(guò)夜禁食（不禁水）后稱重并測(cè)血糖濃度,。對(duì)大鼠進(jìn)行分組，以便按照動(dòng)物數(shù)目和注射劑量來(lái)準(zhǔn)備STZ注射液,。以1%濃度（w/V）溶解STZ，過(guò)濾消毒,，切記STZ*溶解,。
注意：①STZ不穩(wěn)定，易失活,，快速稱取后剩余試劑仍要求干燥避光,，推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙包裹。②注射時(shí)若操作不熟練，切忌不可一次性溶解完STZ,。建議根據(jù)操作熟練度,，分組溶解STZ，比如10只或15只鼠/組,。③亦可提前將STZ按動(dòng)物分組的所需量稱重,，分裝。
1.6 注射
按動(dòng)物空腹體重腹腔或尾靜脈注射,。如果注射操作技術(shù)不熟練,，應(yīng)兩組交替注射，注射應(yīng)在30分鐘內(nèi)完畢,。注意：注射大多要求快速注射,。
注意：①Ⅰ型糖尿病模型：大鼠劑量為70～65mg/kg
Ⅱ型糖尿病模型：高糖高脂喂養(yǎng)1～2 個(gè)月的大鼠,STZ 劑量在25～40mg/kg。
1.7 注射后
注射完STZ后要給予動(dòng)物足夠的水,、食物（糖尿病鼠的基本生活特征）,，需每日換墊料，保持鼠籠干燥,。飼養(yǎng)時(shí),，注意避免強(qiáng)日光照射。盡可能勤消毒,。
注意：STZ造模后,，明顯血糖水平波動(dòng)呈現(xiàn)3個(gè)時(shí)相，一時(shí)性高血糖（1-2h）,、短暫低血糖（6-10h）,、持續(xù)高血糖（>72h）。必須適當(dāng)補(bǔ)給胰島素和葡萄糖,。
2. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型建模效果評(píng)估指標(biāo)
與對(duì)照組對(duì)比,，統(tǒng)計(jì)以下指標(biāo)：
2.1 一般性指標(biāo)：出現(xiàn)多飲、多食,、多尿現(xiàn)象,，體重下降；
2.2 其他指標(biāo)：空腹血糖,、空腹血清胰島素水平,、血清胰島素水平、胰島素敏感性,、糖耐量等,；
2.3 血清生化指標(biāo)：T-Cho、TG,、HDL-C,、LDL-C、CR、BUN,、Alt等,。
2.4 病理切片：胰腺組織病理切片
3.STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的失敗原因解析
3.1 STZ的品質(zhì)是關(guān)鍵，建模用STZ純度應(yīng)不低于98%（HPLC檢測(cè)）,。
3.2 STZ失效：應(yīng)干燥保存,，避免受潮。粉末避免長(zhǎng)時(shí)間室溫放置,，溶解的STZ是非常不穩(wěn)定的,，在中性pH值的半衰期為15分鐘。注意用酸性pH值溶解STZ,，*放在冰浴里,。（了解更多STZ的使用，可查看：h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002 ）
3.3 腹腔注射是否注射到腸子等臟器,。
模型不*,，建議，再觀察3天,，還是不成模型的話,，重新注射一次。
4.STZ誘導(dǎo)小/大鼠死亡率高的原因解析
4.1 鼠的體重過(guò)低,；
4.2 一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導(dǎo)致死鼠);
4.3 高血糖和低血糖都會(huì)造成死鼠,，避免死鼠可以通過(guò)注射胰島素或暫時(shí)補(bǔ)糖，兩種途徑： ①常見(jiàn)為血糖過(guò)高,。補(bǔ)胰島素法,，補(bǔ)一些中效胰島素。例如給諾和靈n或NPH(中性魚(yú)精蛋白鋅胰島素),每次2-3個(gè)單位,，過(guò)了3-5天,，大鼠一般死亡率就低了；②補(bǔ)糖法,，禁食后的鼠,，注射的時(shí)候已經(jīng)處于低血糖狀態(tài)，造模4小時(shí)后腹腔注射20%的葡萄糖,，可避免因注射時(shí)血糖過(guò)低死鼠,；
4.4 防止動(dòng)物自相殘殺。食物缺乏和供水不足的情況下,，會(huì)互相撕殺,、啃食同類，所以食物和飲水要供應(yīng)充足,，*是兩路供應(yīng);
4.5 防止感染。糖尿病大鼠尿量多，墊料潮濕,，需要勤換墊料,，所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現(xiàn)感染，特別是泌尿道感染和腹腔感染,。腹腔注射,、皮下注射及采血測(cè)血糖等侵入性操作前后，要注意消毒工作,。如每次采血測(cè)血糖后可用四環(huán)素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預(yù)防感染,。
5.糖尿病建模的影響因素
糖尿病疾病模型的影響因素包括STZ建模試劑的質(zhì)量、動(dòng)物狀況及給藥方式等,。其中,，試劑主要性能為純度、穩(wěn)定性,、溶解特性等,，動(dòng)物狀況主要包括遺傳背景，雌雄,，性別,，體重，飼養(yǎng)環(huán)境,，飲食結(jié)構(gòu)等,，給藥方式包括給藥時(shí)間、給藥間隔和給藥途徑,。差異化的因素帶來(lái)差異化的建模效果,。
6.STZ建模方法思路梳理
影響因素標(biāo)準(zhǔn)化是實(shí)現(xiàn)建模目的及建模穩(wěn)定性的保證。理論上,，所有的動(dòng)物建模實(shí)驗(yàn)均要求預(yù)實(shí)驗(yàn),。
以STZ誘導(dǎo)糖尿病模型而言，實(shí)驗(yàn)時(shí)STZ的給藥量應(yīng)參照預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,，盡量不要盲目按照文獻(xiàn)上或他人的給藥量來(lái)直接使用,，鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力、禁食時(shí)長(zhǎng),、注射選時(shí),、以及之前飼養(yǎng)過(guò)程、測(cè)糖選時(shí)等都不相同,，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定符合自己實(shí)驗(yàn)鼠的給藥計(jì)量,，才是蕞科學(xué)的。
7.高建模成功率STZ使用指南
STZ保存,、溶解,、分裝等使用注意事項(xiàng),，詳見(jiàn)h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002
