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更新時間:2025-05-13 09:08:52瀏覽次數(shù):36次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的方法有很多種,如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法,、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法,、脂質(zhì)體法、電穿孔法,、顯微注射法等,,2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染,其主要成分為HEPES,,HEPES是一種非離子兩性緩沖劑,,能有效控制pH在6.8~8.2范圍,尤其在pH7.2~7.4具有較好的緩沖能力,,終濃度一般為10~50mmol/L,,培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/L HEPES即可達(dá)到較好的緩沖能力。
Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液,,主要由HEPES,、氯化鈉、磷酸鹽等組成,,其pH值約為6.7,,經(jīng)過濾除菌處理;影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量,、DNA在細(xì)胞上停留的時間,、休克時間,Leagene 2×HeBS要求DNA濃度在10~50μg為宜,,Hela,、BALB等細(xì)胞沉淀放置16h,CHO,、DUKX,、BⅡ等細(xì)胞可以通過甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,,不適用于臨床診斷或其他用途。
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