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實驗試劑
1. 10％中性福爾馬林(pH6．8～7．1)甲醛 10ml 蒸餾水 90ml 醋酸鈉 2g
2. 酸性磷酸酶作用液
蒸餾水 90ml 0．2mol／L醋酸緩沖液(pH4．6) 12ml 5％* 2ml
3. 2％β—甘油磷酸鈉 4ml
先將蒸餾水和醋酸緩沖液混合,，隨后分成大致相等的兩份，一份中加*溶液,，另一份加甘油磷酸鈉溶液，然后再將兩者緩緩混合,，邊混邊攪勻后若酸堿度值不到pH5．0,，可加少量醋酸的調(diào)整。此作用液在臨用前配制,，不能貯存,。配好后的作用液應(yīng)透明無絮狀懸浮物和沉淀，否則將嚴重影響實驗結(jié)果,。
4. 1％硫化胺溶液
硫化胺 1ml 蒸餾水 9ml
5. 姬姆薩染液(1：30)
姬姆薩原液 3滴 磷酸鹽緩沖液(pH6．8) 5ml
6. 6％淀粉肉湯
牛肉膏 0．3g 蛋白胨 1.0g 氯化鈉 0．5g 蒸餾水 100ml
高壓滅菌9．9×104pa(15磅)20min,，再加入可溶性淀粉6g，水溫浴,，促使溶解后置冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
實驗步驟
1. 取小白鼠一只,，每日腹腔注射6％淀粉肉湯1ml，連續(xù)注射三天,。
2. 在第三天注射后3～4h,，再向腹腔注射生鹽水1ml，過3min后在原注射部位抽取腹腔液0．1～0．2ml,。請注意!注射和抽液的進針部位和深度要保持一致,。否則可能抽不出腹腔液。
3. 將腹腔液滴在預冷的載玻片上,，每片1～2滴,，涂片，將玻片垂直插入玻片架,，迅速放到冰箱內(nèi)(4℃),，讓細胞自行鋪展。
4. 30min后,，將玻片轉(zhuǎn)入10％中性福爾馬林,，冰箱內(nèi)4℃固定30min。
5. 自來水漂洗5min,，把水甩干,。
6. 轉(zhuǎn)入酸性磷酸酶作用液中，37℃處理30min,。
7. 自來水漂洗片刻,。
8. 1％硫化胺處理3～5min。
9. 自來水沖洗,，甩干,。
10.用1∶30的姬姆薩染液染色15min,。
11.自來水沖去染液,，用磷酸鹽緩沖液臨時封片，鏡檢,。
12.對照實驗：
將第3步的腹腔液涂片置50℃溫箱中處理30min，使酶失活,，再進行6～11步的同樣實驗,。
