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突變是指在PCR過程中通過堿基改變而引起蛋白質(zhì)氨基酸的改變,。 定點突變：在DNA片段的特定位點引入堿基改變,，或者片段的插入以及刪除。 | ||||||||||||||||||||||||||||
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| 1,、可突變?nèi)魏蝸碓从?dam+陽性菌株的質(zhì)粒 2,、非PCR線性反應(yīng),，可減少不需要的錯誤 3、點突變,，缺失突變,，插入突變 4、突變擴(kuò)增4-14 kb大小,， 具有 > 85% 突變效率 5,、突變< 1 hr ，加上 overnight 轉(zhuǎn)化 | ||||||||||||||||||||||||||||
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| 1,、Agilent* 2,、非PCR 線性反應(yīng)減少不需要的錯誤 3、可突變?nèi)魏蝸碓从?dam+陽性的菌株 4,、約 2 hr 加上 overnight 轉(zhuǎn)化 5,、優(yōu)化后可突變< 8 kb的質(zhì)粒 6、每個反應(yīng)可進(jìn)行1-5 點突變 7,、每個突變點僅需一條突變引物 8,、突變效率擴(kuò)增出一條封閉的單鏈 Agilent部分定點和多點突變試劑盒列表：
隨機(jī)突變是指目的基因發(fā)生突變的部位是隨機(jī)的, 如PCR克隆基因時, 往往產(chǎn)生不確定序列的突變。在Tag酶的作用下, 有時在遇到模板中的A-T對時, 傾向于摻入G-C對, 而使基因序列發(fā)生改變,。隨機(jī)突變常用于鑒定克隆的DNA中特定功能在基因序列中所處的位置及其與周圍序列的關(guān)系,。如果對所克隆的DNA特定序列所編碼的產(chǎn)物及其功能知之甚少，可采用隨機(jī)突變法進(jìn)行研究,，以確定功能區(qū)域有助于縮小研究范圍,。 | ||||||||||||||||||||||||||||
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