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原生質(zhì)體是指植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁的裸露部分,。它在培養(yǎng)條件下,，①具有再生細(xì)胞壁，進(jìn)行連續(xù)的細(xì)胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有攝取外源大分子,、細(xì)胞器,，以及細(xì)菌，病毒的能力,，因此是進(jìn)行遺傳操作,，基因轉(zhuǎn)移的好材料；③通過同種和異種植物的原生質(zhì)體融合,，可產(chǎn)生異核體,，實現(xiàn)體細(xì)胞雜交，培育出新品種,。
實驗原理
去掉植物細(xì)胞壁的方法可以是機(jī)械的人工操作,，也可以利用酶解法。較早利用機(jī)械法制備原生質(zhì)體的*Klercker（1892）,，直到1960 年英國科學(xué)家Cocking 才*次用酶法大量制備原生質(zhì)體,。本實驗以植物的葉肉組織為材料，利用纖維素酶和果膠酶來消化細(xì)胞壁,，分離細(xì)胞,。
實驗用品
器具：顯微鏡、離心機(jī),、離心管,、剪刀（2）、鑷子（2）,、吸管,、小培養(yǎng)皿、載片,、蓋片,。
試劑：0.16mol/L CaCI.2.H2O、20%蔗糖液,、酶解液
材料：油菜或菠菜或煙草
實驗方法步驟
1,、取材 根據(jù)實驗?zāi)康暮蜅l件選取不同的材料
2、分離原生質(zhì)體
① 撕葉下表皮
② 酶解 將撕去下表皮的葉片剪成小塊,，放在盛有5mL 酶液的小培養(yǎng)皿中,，讓去除下表皮的一面接觸酶液，輔滿一層,，在25~28℃下酶解60~90 分鐘
3,、收集純化
（1）用吸管將酶解液吸至5mL 離心管中，以600rpm 離心5 分鐘以上,，使原生質(zhì)體沉降
（2）將上清（酶解液）回收,，剩下原生質(zhì)體及殘渣于管底
（3）加氯化鈣液約2mL，輕輕吹打均勻
（4）用注射器向離心管底部緩緩注入蔗糖約2—3mL，出現(xiàn)下部蔗糖液,，上部原生質(zhì)體懸浮液
（5）以600rpm 離心10 分鐘,，在兩液相之間出現(xiàn)一條綠色帶，便是純凈的原生質(zhì)體
4,、觀察或培養(yǎng)
取少許原生質(zhì)體于載片上,，蓋片觀察其形態(tài)，或者將原生質(zhì)體接種在培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),，再生植株
