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TUNEL法 檢測細(xì)胞凋亡

2013-4-2  閱讀(1557)

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細(xì)胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,,將脫氧核糖核苷酸和熒光素,、過氧化物酶,、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測,,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL),。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂,,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色,。TUNEL實際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,,對完整的單個凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,,可用于石蠟包埋組織切片,、冰凍組織切片,、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)測定,并可檢測出極少量的凋亡細(xì)胞,,因而在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用,。

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