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一,、什么樣的客戶適合選用DuoSet ELISA?
主要為客戶篩選高通量的指標而設計的,，適合熟悉ELISA研發(fā)的實驗人員使用,。沒有ELISA經(jīng)驗,，進行ELISA檢測的客戶不建議使用,。
二,、DuoSet ELISA Kit 里面一共有多少塊板子,？
1個DuoSet試劑盒包含的試劑可以滿足大約15塊96孔微孔板的檢測。
三,、DuoSet ELISA Kit檢測的樣本類型是什么,？
檢測樣本類型：細胞培養(yǎng)的上清液
熟悉ELISA研發(fā)的實驗人員已成功將其推廣到血清和血漿樣本的使用。如果要決定試劑盒是否可用于組織勻漿（或其它未經(jīng)檢驗）的樣本,，實驗者先做一個“摻入和回收預試驗”,。
簡單來說，實驗者將樣本分為兩份：一份中摻入一定量的試劑標準,，然后做一稀釋系列（一般稀釋到1:16）,，再將摻入過的一份同未摻入的一份相比。采用以下的公式來計算回收率（%）：測試值（pg /毫升）/ 期待值（pg /毫升）x 100% = % 回收率,。一般來說,，回收率在80-120%可認為是可接受的。但是,，可接受范圍應由每一實驗室自行決定,。這種方法可用于檢定未被R&D Systems檢定的任何樣本。我們還有更加詳細的“摻入和回收”的實驗步驟,，可向我們的技術(shù)服務部索取,。我們也可進一步查閱文獻看一看是否有其他試驗人員用我們的產(chǎn)品做過不同的樣本，或不同的屬種。
四,、DuoSet ELISA Kit包括哪些組分,？
DuoSet 包括4種組分：
Ø 捕獲抗體（Capture Antibody）
Ø 檢測抗體 （Detection Antibody）
Ø 標準品（Recombinant Standard）
Ø 親和素-辣根過氧化物酶（Streptavidin-HRP）
五、DuoSet ELISA Kit需要另行購買的輔助試劑有哪些,？
PBS:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 8.1 mM Na2HPO4, 1.5 mM KH2PO4, pH 7.2 - 7.4, 0.2 µm filtered
Wash Buffer: （Catalog # WA126）, or equivalent
Reagent Diluent*
Blocking Buffer*
Substrate Solution: 1:1 mixture of Color Reagent A （H2O2） and Color Reagent B （Tetramethylbenzidine） （Catalog # DY999）
Stop Solution: 2 N H2SO4 （Catalog # DY994）
Microplates: R&D Systems （Catalog # DY990）, or equivalent
Plate Sealers: ELISA Plate Sealers （Catalog # DY992）, or equivalent
*For the Reagent Diluent and Blocking Buffer recommended for a specific DuoSet ELISA Development Kit, please see the product datasheet.
Wash Buffer: （Catalog # WA126）, or equivalent
Reagent Diluent*
Blocking Buffer*
Substrate Solution: 1:1 mixture of Color Reagent A （H2O2） and Color Reagent B （Tetramethylbenzidine） （Catalog # DY999）
Stop Solution: 2 N H2SO4 （Catalog # DY994）
Microplates: R&D Systems （Catalog # DY990）, or equivalent
Plate Sealers: ELISA Plate Sealers （Catalog # DY992）, or equivalent
*For the Reagent Diluent and Blocking Buffer recommended for a specific DuoSet ELISA Development Kit, please see the product datasheet.
六,、客戶使用了DuoSet ELISA開發(fā)系統(tǒng)，但幾乎就沒有顏色產(chǎn)生,。哪些步驟可能出了問題,？
很多方面都會影響到顏色的產(chǎn)生。比如：
1） BSA的干擾,。選擇不含脂肪酸的ELISA級別的BSA很重要,，可以降低球蛋白對實驗的干擾。R&D Systems建議使用millipore的BSA（目錄#82-045）,。
2） 非室溫下的試劑在使用時會抑制信號,；如果室溫過低，信號也會被抑制,。
3） 如果使用了未表明為“高結(jié)合性ELISA”的微孔板,，捕獲抗體同微孔板的結(jié)合就不牢固，從而導致測試的顏色產(chǎn)生過低,。R&D Systems建議使用R&D（cat#DY990,25pcaks） 或者Costar EIA Plate （cat#2592）,。
4） 任何試劑，如果配制出錯,、儲藏不當,、或已過期，都將出現(xiàn)這一問題,。R&D Systems建議：捕獲抗體,、檢測抗體、標準品,、親和素-辣根過氧化物酶溶解之后必須在都有效期內(nèi)使用完。
5）讀板時使用的波長同底物的波長不一致,。
