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1.RNA提取的樣品很重要,，包括樣品的質(zhì)量,，細(xì)胞數(shù)，雜質(zhì)含量等等，建議：按照說(shuō)明書的要求,，每毫升TRIzol不超過(guò)100mg再低些在50mg左右;樣品的質(zhì)量一定要控制好；研磨得時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，成粉狀即可,，液氮常加（研磨的意義主要是使細(xì)胞與TRIzol的作用更充分，如有團(tuán)塊挑出取質(zhì)舍量）,；作用時(shí)間15分鐘,；
2.氯仿抽提，一定要混勻,，劇烈些沒(méi)關(guān)系,。但一定要充分作用；
3.異丙醇沉淀,，混勻,，冰上操作會(huì)在一定程度上增加RNA產(chǎn)量；
4.75%乙醇清洗一次即可,，速度我一般選擇高速8000g-10000g之間的,，結(jié)果都可；
5.檢樣,，zui主要的是配置的瓊脂糖膠和電泳緩沖液一定要避免RNA酶的污染,，如果有固相RNA酶去除劑，可以用其處理電泳槽5-10后（時(shí)間以說(shuō)明書為準(zhǔn)），用高壓后的DEPC水沖洗即可,，方便,，呵呵；
以上是我認(rèn)為在RNA提取過(guò)程的體會(huì),，歡迎大家討論,，至于反應(yīng)的時(shí)間按照說(shuō)明書調(diào)整，其實(shí)說(shuō)明書已經(jīng)放的比較寬了,，這個(gè)我覺(jué)得沒(méi)有必要討論,。
