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分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,。常用于核酸,，蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。 這種方法是在280nm波長,，直接測試蛋白,。

具體使用：

選擇Warburg 公式,，光度計可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應(yīng)的換算方法,，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度,。蛋白質(zhì)測定過程非常簡單，先測試空白液,，然后直接測試蛋白質(zhì),。由于緩沖液中存在一些雜質(zhì)，一般要消除320nm 的“背景”信息,，設(shè)定此功能“開”,。與測試核酸類似，要求A280的吸光值至少大于0.1A,，*的線性范圍在1.0-1.5 之間,。實驗中選擇Warburg 公式顯示樣品濃度時，發(fā)現(xiàn)讀數(shù)“漂移”,。這是一個正常的現(xiàn)象,。事實上，只要觀察A280的吸光值的變化范圍不超過1%,，表明結(jié)果非常穩(wěn)定,。漂移的原因是因為Warburg 公式吸光值換算成濃度，乘以一定的系數(shù),，只要吸光值有少許改變,，濃度就會被放大，從而顯得結(jié)果很不穩(wěn)定,。

可能存在的誤差：

蛋白質(zhì)直接定量方法，適合測試較純凈,、成分相對單一的蛋白質(zhì),。紫外直接定量法相對于比色法來說，速度快,，操作簡單,；但是容易受到平行物質(zhì)的干擾，如DNA的干擾,；另外敏感度低,，要求蛋白的濃度較高，都可能出現(xiàn)一定的誤差,。