IMR90細胞- IMR90細胞株,；全國各地均可出售,，誠招全國代理商

【產品名稱】人胚肺成纖維細胞

【細胞代號】IMR90細胞

【生長狀態(tài)】貼壁生長

【細胞形態(tài)】成纖維細胞

【庫存狀態(tài)】現貨

【運輸形式】復蘇活細胞或凍存細胞

【復蘇意義】細胞復蘇是將休眠的細胞重新活化，使之重新生長進入細胞周期,，進而分裂產生子細胞,，重新獲得細胞類型特異的生物學功能。

IMR90細胞- IMR90細胞株,；收到細胞株包裹時,， 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請立即通知,。細胞株請盡速開始培養(yǎng),， 或立即冷凍保存(置于–70 °C， 隔夜后,， 移到liq N2),。

細胞復蘇的原則－快速融化：

必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,，對細胞造成損害,。

具體操作

一. 實驗前準備：

1.將水浴鍋預熱至37℃

2.用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。

3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管,、吸管,、培養(yǎng)瓶等等。

二．取出凍存管：

1.根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號,。

2.從液氮罐中取出細胞盒,，取出所需的細胞，同時核對管外的編號,。

三．迅速解凍：

1.迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化,。

2.約1-2min后凍存管內液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,，再拿入超凈臺內,。

四.平衡離心：用架盤天平平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min

五.制備細胞懸液：

1.吸棄上清液,。

2.向離心管內加入10ml培養(yǎng)液,，吹打制成細胞懸液。

六.細胞計數：細胞濃度以5×105/ml為宜,。

七.培養(yǎng)細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內,，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細胞情況而定,。

初學者易犯錯誤：

1水浴鍋未預熱或者未預熱到37℃,。

2.水浴鍋內凍存管太多，導致傳熱不佳,，使融化時間延長,。

3.離心前忘記平衡，導致離心機損壞和細胞丟失,。

4.一次復蘇細胞過多,，忘記更換吸頭和吸管，導致細胞交叉污染,。

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