人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）ELISA Kit

產(chǎn)品名稱：人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）ELISA Kit

別名：人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）ELISA檢測試劑盒,；人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）ELISA酶免試劑盒,；人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）ELISA試劑盒

英文名稱：Human Ninjurin-2（NINJ2） ELISA kit

產(chǎn)品類型：ELISA Kit

種屬：Human

待測物名稱： ninjurin 2

縮寫：NINJ2

適合樣本： serum, plasma, tissue homogenates

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和15%

檢測范圍：                                             

30pg/ml  -1800pg/ml 

保存溫度：4°C（三個月內(nèi)使用）,；-20°C（三個月后使用）

有效期：4°C（保存6個月）,；-20°C（保存一年）

注意：本試劑盒僅供科研使用

目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）含量,。

實驗原理：

   本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）水平,。用純化的人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）,，再與HRP標記的神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2（NINJ2）濃度。

試劑盒組成：

操作步驟

1.       標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,，在*,、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*,、第二孔中加標準品稀釋液50μl,，混勻；然后從*孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻,；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中,，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,，混勻,；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中,，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為1800pg/ml,， 1200pg/ml，600pg/ml,，300pg/ml,， 150pg/ml）。

2.       加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。

3.       溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.       配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。

5.       洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。

6.       加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。

7.       溫育：操作同3,。

8.       洗滌：操作同5。

9.       顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.    終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11.    測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標     

準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋      倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。                 

  注意事項：

1．  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．  濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。

3．  各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。

4．  請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5．  封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。

6．  底物請避光保存,。

7．  嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．  所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

9．  本試劑不同批號組分不得混用,。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準,。