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實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR,，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加,。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析,。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析,、基因表達(dá)差異分析、基因分型,。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì),、RNA提取,、cDNA合成、qPCR,。
優(yōu)點(diǎn)：
(1)操作簡(jiǎn)單,，LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行，對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,，產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷,。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT．LAMP)，不需要特殊的試劑及儀器,。
(2)快速高效,，因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性．避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失．核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成，添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1／2,，多數(shù)情況在20,。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,，達(dá)0.5 mg／mL．應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè),。
(3)高特異性，由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物,。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增,。故其特異性*。
(4)高靈敏度,，對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,，比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途：
1. 方便,，用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn),。
2. 快捷，操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,，能減少污染,，降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,，PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,，反應(yīng)的靈敏度高,，特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品,。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,，不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果：將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板，引物和水共15 μL 混合后,，直接進(jìn)行PCR反（PCR 參數(shù)由用戶自己確定）,，反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,，不同的樣本有不同要求,，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4）樣本保存于液氮或干冰,，也可以保存于Trizol液中。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A,、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
血瓊脂基礎(chǔ) (CM0055)金雀花堿(野靛堿)N-芴甲氧羰基-O-(芐基磷酰基)-L-絲氨酸NADPH peptide  還原型輔酶Ⅱ抗原

麥芽浸膏肉湯 (CM0057)秋水仙堿N-芴甲氧羰基-O-(芐基磷?；?-L-絲氨酸proCNP/NPPC (pro-natriuretic peptide)  促尿鈉排泄肽前體C抗原

麥芽浸膏瓊脂 (CM0059)薯蕷皂苷元N-芴甲氧羰基-O-(芐基磷?；?-L-絲氨酸NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2)  神經(jīng)肽Y受體2（多肽）

蛋白胨水 (Andrade)薯蕷皂苷甲叉膦酸NPY1R (neuropeptide Y1 receptor)  神經(jīng)肽Y1受體抗原

Nutire Broth No.2 2 號(hào)營(yíng)養(yǎng)肉湯原薯蕷皂甙4-氨基-3-氯-5-甲NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase l)  醌氧化還原酶抗原

伊紅美蘭瓊脂 (Levine 培養(yǎng)基) (CM0069)蛇床子素4-氨基-3-氯-5-甲NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  谷氨酸受體1（多肽）

尿素肉湯基礎(chǔ) (Christensen 瓊脂基礎(chǔ)) (CM0071)麝香酮3-四甲NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  谷氨酸受體1抗原

葡萄糖胰蛋白胨肉湯 (CM0073)酚3-四甲NR1/NMDAR1  谷氨酸受體1

MLH1/FITC  熒光素標(biāo)記錯(cuò)配修復(fù)蛋白1IgGcGMP依賴性蛋白激酶2[3-(trifluoromethyl)phenyl]hydrazinePorcine iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independe) 檢測(cè)試劑盒

MMP-1/FITC   熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1IgG結(jié)蛋白樣蛋白CGNL1釷試劑Porcine GJβ1 (Gap Junction Protein Beta 1) 檢測(cè)試劑盒

MMP-1/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白CGREF1釷試劑Porcine AR (Amphiregulin) 檢測(cè)試劑盒

MMP-2/FITC   熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-2IgG富含亮氨酸軟骨蛋白釷試劑Porcine CgB (Chromogranin B) 檢測(cè)試劑盒

MMP-3/FITC   熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-3IgG軟骨蛋白樣蛋白4-(三氟甲基)肼Porcine Gp49a (Glycoprotein 49A) 檢測(cè)試劑盒

MMP-7/PE  熒光素PE標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-7IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD34-(三氟甲基)肼Porcine ACTα1 (Actin Alpha 1, Skeletal Muscle) 檢測(cè)試劑盒

MMP-8/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-8IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD10九氟丁基磺酸酐Porcine GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) 檢測(cè)試劑盒

MMP-9/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-9蛋白IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD72-氟-4-胺Porcine PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) 檢測(cè)試劑盒
枇杷葉染料法PCR鑒定試劑盒AVL292MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb

5-甲基煙酸ERCC1 (D61F5) Rabbit mAb

2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯酚Phospho-Histone H2A.X (Ser139/Tyr142) Antibody

3,5-二羧酸吡啶SKAR α/β (D65E8) XP® Rabbit mAb

5-氟吲哚-2-羧酸LRP5 (D5G4) Rabbit mAb

2-乙基-6-甲基-3-吡啶琥珀酸鹽RBPSUH Antibody

3-環(huán)戊基-L-氨酸Ikaros Antibody

N-Boc-1,2,5,6-四氫吡啶-4-酸頻哪酯Phospho-SHIP2 (Tyr1135) (D33C6) XP® Rabbit mAb

(S)-N-縮水甘油鄰苯二甲酰亞胺EpCAM (VU1D9) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

SEA-0400Nanog (D73G4) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)