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ELISA試劑盒操作與使用注意事項
閱讀:1593 發(fā)布時間:2020-9-16ELISA試劑盒注意事項:
1.ELISA試劑盒操作時需戴手套,、穿工作衣,,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
2.終止液具有腐蝕性,,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗,。
3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解,。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈,。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮,。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號試劑組分不得混用,。
ELISA試劑盒操作步驟:
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,,設(shè)空白對照1孔,、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,,2~8℃保存,。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl,;陰、陽性對照孔分別加入陰,、陽性對照100μl,;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,,置37℃反應(yīng)30分鐘,。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,重復(fù)洗滌5次,拍干,。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外),。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,,同步驟5,。
8.每孔ELISA試劑盒依次加底物液A、底物液B各50μl,,混勻,,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,,混勻,,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值),。