技術文章
ELISA試劑盒操作與使用注意事項
閱讀:1738 發(fā)布時間:2020-9-16ELISA試劑盒注意事項:
1.ELISA試劑盒操作時需戴手套,、穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理,。
2.終止液具有腐蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗,。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存,。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶,,使用時需恢復至室溫以*溶解,。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮,。
7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,。
8.不同批號試劑組分不得混用。
ELISA試劑盒操作步驟:
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,,恢復至室溫,。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔,、陰性/陽性對照各2孔,,未用的板條盡快密封,2~8℃保存,。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl,;陰,、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl,;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。
4.混勻,置37℃反應30分鐘,。
5.扣去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,重復洗滌5次,,拍干。
6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外),。置37℃反應30分鐘,。
7.洗滌,同步驟5,。
8.每孔ELISA試劑盒依次加底物液A,、底物液B各50μl,混勻,,37℃避光反應10分鐘,。
9.每孔加終止液50μl,混勻,,用空白孔調(diào)零,,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。