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大鼠ELISA試劑盒操作步驟：

1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個大鼠ELISA試劑盒聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,，4℃ 過夜,。次日，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次,，每次3分鐘。（簡稱洗滌,，下同）,。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時,。然后洗滌,。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）,。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌,。

4.　加底物液顯色：于各反應大鼠ELISA試劑盒孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃ 10～30分鐘。5.　終止反應

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示,。也可測OD值：在大鼠ELISA試劑盒上,，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。

大鼠ELISA試劑盒說明書：

1,、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,。

2,、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。

3,、建議所有的標準品、樣本和空白大鼠ELISA試劑盒對照都做雙份檢測,，取平均值,，以減小實驗誤差。

4,、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,，不同批號的試劑不得混用。