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大鼠ELISA試劑盒操作步驟：

1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml,。在每個(gè)大鼠ELISA試劑盒聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃ 過夜。次日,，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘,。（簡稱洗滌,，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,，置37℃ 孵育1小時(shí),。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔,，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）,。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃ 孵育0.5～1小時(shí),，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)大鼠ELISA試劑盒孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃ 10～30分鐘,。5.　終止反應(yīng)

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強(qiáng),，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”,、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在大鼠ELISA試劑盒上,，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,，即為陽性。

大鼠ELISA試劑盒說明書：

1,、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。

2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。

3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品,、樣本和空白大鼠ELISA試劑盒對(duì)照都做雙份檢測(cè),，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差,。

4,、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用,。