詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。
產品名稱 | 9號染色體開放閱讀框142抗體 |
英文名稱 | C9orf142 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
睪英文名稱:Testosterone propionate保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg基質金屬蛋白酶9一抗
芐氟噻嗪英文名稱:Bendroflumethiazide保存:20℃,避光規(guī)格:100mg髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白一抗
甘油三油英文名稱:Three oleic acid ester of glycerol保存:20℃,,避光規(guī)格:0.15ml多藥耐藥相關蛋白1一抗
香荊芥英文名稱:Carvacrol保存:20℃,,避光規(guī)格:0.15ml多藥耐藥相關蛋白2一抗
白果新(銀杏)英文名稱:Ginkgolic acid (Yin Xingsuan)保存:20℃,避光規(guī)格:20mg線粒體核糖體蛋白L28一抗
β,β二酰阿卡寧英文名稱:Beta, beta two methyl acryloyl Akanin保存:20℃,,避光規(guī)格:20mg錯配修復蛋白2一抗
天然冰片(右旋)英文名稱:Natural borneol (dextrobomeol)保存:20℃,,避光規(guī)格:50mg褪黑素受體1A/松果體素受體1A一抗
牡荊素(牡荊苷)英文名稱:Vitexin (Mu Jinggan)保存:20℃,避光規(guī)格:20mg髓樣分化蛋白一抗
溴檳榔英文名稱:Arecoline hydrobromide保存:20℃,,避光規(guī)格:50mg粘蛋白2/上皮膜抗原2一抗
對二英文名稱:On two chlorobenzene保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg粘蛋白4一抗
檸檬英文名稱:Citric acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mgMYC結合蛋白2一抗
啡英文名稱:Caffeic acid ethyl ester保存:20℃,,避光規(guī)格:50ml精/脯富含卷曲蛋白1一抗
正十五英文名稱:Are fifteen alkyl保存:20℃,,避光規(guī)格:0.2ml微管相關蛋白9一抗
正十九英文名稱:Are nineteen alkyl保存:20℃,,避光規(guī)格:0.2ml有絲分裂驅動蛋白樣1一抗
環(huán)英文名稱:Cyclohexane保存:20℃,避光規(guī)格:0.2ml結核分枝桿菌一抗
辛英文名稱:Octyl acetate保存:20℃,,避光規(guī)格:0.5ml肌肉骨骼受體酪激酶一抗
脫卡維英文名稱:Dehydrogenation of Cavitin保存:20℃,,避光規(guī)格:20mg膜相關環(huán)指蛋白1一抗
9號染色體開放閱讀框142抗體25mgpH試紙 pH0.5-5.020813-76-770578-24-496T肌紅蛋白(MYO)GC≥98%GTP酶NRas檢測試劑盒20mgPIIINP2243-76-7化學試劑趨化子C-C-元配體1(CCL1)25mgpH試紙 pH2.7-4.771672-86-1466-24-096T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%Gremlin-1蛋白檢測試劑盒100mgL-FABP2243-76-7化學試劑細胞外質糖蛋白(MEPE)
25mgpH試紙 pH2.7-4.771672-86-1466-24-096T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%Gremlin-1蛋白檢測試劑盒100mgL-FABP2243-76-7化學試劑細胞外質糖蛋白(MEPE)25mgpH試紙 pH8.2-1071672-86-163238-67-596T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%GDP解離抑制子2檢測試劑盒20mgD-LDH2243-76-7化學試劑淋巴細胞功能關聯(lián)抗原1α(LFA1α)
25mgpH試紙 pH8.2-1071672-86-163238-67-596T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%GDP解離抑制子2檢測試劑盒20mgD-LDH2243-76-7化學試劑淋巴細胞功能關聯(lián)抗原1α(LFA1α)25mgPH值標準(PH4.01)35908-31-796T足盂蛋白(PCX)HPLC≥98%GAD/IA2自身抗體試劑盒250mgL-LDH1718-34-9化學試劑含纈酪肽蛋白(VCP)
25mgPH值標準(PH4.01)35908-31-796T足盂蛋白(PCX)HPLC≥98%GAD/IA2自身抗體試劑盒250mgL-LDH1718-34-9化學試劑含纈酪肽蛋白(VCP)25mgPH值標準(PH4.01)35908-31-7509-20-696T前列腺抑制肽(PIP)HPLC≥98%G1/S特異性細胞周期蛋白E1檢測試劑盒20mgTCR-Ab1718-34-9化學試劑神經介素U(NMU)
25mgPH值標準(PH4.01)35908-31-7509-20-696T前列腺抑制肽(PIP)HPLC≥98%G1/S特異性細胞周期蛋白E1檢測試劑盒20mgTCR-Ab1718-34-9化學試劑神經介素U(NMU)25mgPH值標準(PH4.01)96T肝素酶(HPA)HPLC≥98%F-肌動蛋白檢測試劑盒5mgFLU-A1058-92-0化學試劑信號傳導轉錄激活子6(STAT6)