詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | ADP核糖基化因子1抗體 |
英文名稱 | ARF1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
魚精蛋白鹽來源于鮭魚 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:Grade II,sigma分裝純度:≥98%
5溴43吲哚基鹽鈉鹽(分子生物學(xué)級(jí)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí)純度:≥98%
乙銅水合物(>99%,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99%,,BR純度:≥98%
肌鈉鹽四水 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
1,6二果糖三鈉鹽(98101.0%,,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:98101.0%,BR純度:0.97
1,6二果糖三鈉鹽(98101.0%,,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:98101.0%,,BR純度:0.97
酒石銨(>99%,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99%,,BR純度:≥97%
碳鉀無水(>98%,,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
牛(>98.5%,,JP ) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98.5%,,JP 純度:≥98%
草銨(98~101%,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:98~101%,BR純度:≥98%
5'單腺苷(>95%,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>95%,,BR純度:98%
鋁十六水(>98%,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
葡萄糖6脫酶,,銨懸浮液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:酶活>200 NADP units/mg,BC純度:≥95%
蘋果脫酶(>12,000U/ml,,BC) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>12,000U/ml,,BC純度:≥98%
N羥基丁二酰亞(>98%,BR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
沒食子一水物(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥92%
RING5 環(huán)指蛋白5一抗(E3泛素蛋白連接酶RNF5) * 0.2ml Perindopril erbumine
RPL15 核糖體蛋白L15一抗 * 0.2ml phenylbutazone
RPL19 核糖體蛋白L19一抗 * 0.2ml phenylbutazone
RPL5 核糖體蛋白L5一抗 * 0.2ml phenylbutazone Calcium
RRBP1 核糖體結(jié)合蛋白1一抗 * 0.2ml phenylbutazone Sodium
S100A7/Psoriasin S100鈣結(jié)合蛋白A7一抗 * 0.2ml Pirfenidone
RBBP6 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白6一抗 * 0.2ml Pirfenidone
S100PBP/S100P binding protein S100P結(jié)合蛋白一抗 * 0.2ml Pitavastatin Calcium /NK104
ADP核糖基化因子1抗體Pseudomonas sp.分離基物: 馴化活性污泥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于環(huán)境污水處理研究。培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 28-37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Cryptococcus humicolus分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 25-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Monascus fuliginoscus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵紅曲培養(yǎng)基: CM0013生長(zhǎng)條件: 30-32℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Fusarium guttiforme分離基物: 冷卻機(jī)油提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Sphaeropsis sapinea (Fr.) Dyko & B. Sutton分離基物: 樟子松提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Enterobacter sp.分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
Vibrio rumoiensis分離基物: 水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物活性微生物/具有殺死有害藻華原因種塔瑪亞歷山大藻的活性培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Aspergillus sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法