Pluronic F-127實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限,，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度,，并記錄在電腦軟件之中，通過(guò)對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：Pluronic F-127
貨號(hào)：FSP082
產(chǎn)品規(guī)格：100 mg/1 g
分類：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸：低溫,、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén),。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 ,。
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儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后,，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
探針?lè)ǎ?/font>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān),。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì),。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端,。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累,。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性,。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min,。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
大鼠金屬硫蛋白（MT）分析檢測(cè)試劑盒Torin 2100 ul

大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子（KAF）/雙調(diào)蛋白（AR）分析檢測(cè)試劑盒FTO Antibody100 ul

大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（GDNF）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Ser-Pro-Pro Motif [pSPP] Rabbit mAb300 ul

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5（MMP-5）分析檢測(cè)試劑盒SignalSilence® OSR1 siRNA I100 ul

大鼠胱天蛋白酶8（Casp-8）分析檢測(cè)試劑盒PSMC2 (D5T1T) Rabbit mAb100 ul

大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG（GAD-Ab-IgG）分析檢測(cè)試劑盒M-RIP (D8G8R) Rabbit mAb100 ul

大鼠谷氨酸脫羧酶1（GAD1）分析檢測(cè)試劑盒Eg5 (E1L3W) Rabbit mAb100 ul

大鼠高密度脂蛋白3（HDL3）分析檢測(cè)試劑盒NRF2 (D1Z9C) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

大鼠甘油三酯（TG）分析檢測(cè)試劑盒Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control (Pacific Blue™ Conjugate)100 ul

大鼠鈣調(diào)磷酸酶（CaN）分析檢測(cè)試劑盒Ras (G12V Mutant Specific) (D2H12) Rabbit mAb100 ul

大鼠二氧化酶（DAO）分析檢測(cè)試劑盒Nav1.5 (D9J7S) Rabbit mAb100 ul

大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）分析檢測(cè)試劑盒Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

大鼠蛋白磷酸酶（PP）分析檢測(cè)試劑盒c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)100 ul

大鼠促卵泡素（FSH）分析檢測(cè)試劑盒Ras (G12D Mutant Specific) (D8H7) Rabbit mAb100 ul

大鼠雌酮（E1）分析檢測(cè)試劑盒SF3B1 (D7L5T) Rabbit mAb100 ul

大鼠胞漿型磷脂酶A2（cPLA2）分析檢測(cè)試劑盒CART (D6M2M) Rabbit mAb100 ul

大鼠白介素32（IL-32）分析檢測(cè)試劑盒LEF1 (C12A5) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
Pluronic F-127Stropharia│rugosoannulata Farl. ex Murrill分離基物: 子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 20～25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Streptomyces│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 其他

Escherichia│coli分離基物: 種鴨大腸斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 動(dòng)物疫苗培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 腹瀉犢牛糞便凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研及血清定型培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Ochrobactrum│pituitosum Huber et al.分離基物: 山茶葉片斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長(zhǎng)條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Salmonella│gallinarum分離基物: 肉雞盲腸凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗藥性檢驗(yàn)培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Nigrospora│sp.分離基物: 白芷植物組織斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 藥用植物內(nèi)生菌培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)

Trichoderma│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Pseudomonas│分離基物: 便凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 36℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息）,，我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線,；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式,、服務(wù)期限等,，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞）,，本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針?lè)ǎ?，可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）,。如果由您自己提供,，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針,。
我們進(jìn)行RNA抽提,、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄,、Real-time PCR擴(kuò)增,、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,，包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程,、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線,、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。