詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體 |
英文名稱 | Aspartate Aminotransferase |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
硬脂紅霉素標(biāo)準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Erythromycin Stearate
阿曲庫銨標(biāo)準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Atracurium Besylate
甲標(biāo)準品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:Formic Acid
乙測定用乙對照溶液標(biāo)準品(乙水溶液)
規(guī)格:5mlX5ampules 英文名稱:Alcohol DeterminationAlcohol
乙標(biāo)準品 規(guī)格:1.2mLx5ampules 英文名稱:Alcohol
鹽地匹福林標(biāo)準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Dipivefrin Hydrochloride
阿莫地鹽鹽標(biāo)準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Amodiaquine Hydrochloride
麥角異標(biāo)準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Ergotaminine (List Chemical)
吲達帕相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
D麥芽三糖 * 英文名稱:Maltotriose 含量:超純,,98%
D脯氨酰 * 英文名稱:DProlinamide 含量:BR,99%
D葡糖 * 英文名稱:DGlucuronicacid 含量:BR,,98%
D葡糖 * 英文名稱:SodiumDglucuronate 含量:BR,,98%
D葡萄糖6鋇鹽 * 英文名稱:6PGBa 含量:高純,99%
D葡萄糖r內(nèi)酯 * 英文名稱:DGlucurone 含量:BR,,98%
D葡萄糖鈣 * 英文名稱:CalciumDgluconate 含量:BR,,97%
D葡萄糖無水物 * 英文名稱:DGlucoseanhydrous 含量:高純,97%
D氫賴氨 * 英文名稱:DLysineHCL 含量:BR,,99%
D氫組氨 * 英文名稱:DHistidinemohydrochloridemohydrate 含量:BR,,99%
谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體Pseudomonas solanacearum (Smith) Smith分離基物: 組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 30存儲條件: 定期移植法
Escherichia coli分離基物: 不清楚提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Natronorubrum aibiense分離基物: 鹵水及底泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 基礎(chǔ)理論及應(yīng)用研究培養(yǎng)基: 0926生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Monilinia fructigena Honey分離基物: 自然發(fā)病果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 22-25存儲條件: 定期移植法
Klebsila terrigena分離基物: 活性污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 環(huán)境污水處理培養(yǎng)基: NB生長條件: 37℃,24h,,陰性桿菌,,純存儲條件: 真空冷凍干燥法
Aspergillus niger提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 白酒糖化用菌。培養(yǎng)基: CM0084生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Pseudoalteromonas sp.分離基物: 沉積物/深灰色沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 極地細菌 產(chǎn)酶微生物/蛋白酶,、脂酶(三丁酸甘油酯)培養(yǎng)基: 821生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Micromonospora sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗細菌,;抗金黃色葡萄球菌,;抗枯草芽孢桿菌;抗瘧疾培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C存儲條件: 真空冷凍干燥
Rhizopus microsporus var. chinensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法