詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
產品名稱 | 凋亡抑制因子5抗體 |
英文名稱 | API5 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
壬10標準品Rat Somatostatin ELISA Kit純度:0.984
尼扎替定標準品Rat Somatostatin ELISA Kit純度:0.996
5-基糠醛二乙酯標準品Rat Ghrelin ELISA Kit純度:0.998
西林標準品Rat ghrelin ELISA Kit純度:0.993
妥英標準品Rat ghrelin ELISA Kit純度:0.98
基三乙標準品Rat Epinephrine ELISA Kit純度:0.997
唑尼特標準品Rat neuropeptide Y ELISA Kit純度:0.999
Chicken Thyroxine,T4 ELISA Kit雞狀腺素(T4)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121579-201001TCL法鑒別石見穿規(guī)格:10.0g
Chicken Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit雞三狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121581-200701鑒別印度樟牙菜規(guī)格:1.0g
Chicken anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit雞抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 進口/分裝規(guī)格:96T/48T121582-201001TCL法鑒別裸花紫珠規(guī)格:2.0g
Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit雞核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒進口/原裝規(guī)格:96T/48T121583-200901TCL法鑒別羊耳菊規(guī)格:2.0g
Chicken toxoplasma circulating antigen,TCA ELISA Kit雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130100-200901供殘留溶劑檢查用▲醇規(guī)格:1ml
Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 雞狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130101-200901供殘留溶劑檢查用正醇規(guī)格:1ml
凋亡抑制因子5抗體銅轉運蛋白質α鏈抗體1-Hydroxycanthin-6-one中文名:1-羥基鐵屎米酮別名:分子式:C14H8N2O2
單克隆/抗體Thymidine中文名:胸苷別名:胸腺嘧啶核苷分子式:C10H14N2O5
抑癌基因ras同源家族1抗體Crenatine中文名:別名:1-Ethyl-4-methoxy-β-carboline分子式:C14H14N2O
轉錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體Harmine中文名:去氫駱駝蓬堿別名:7-Methoxy-1-methyl-β-carboline分子式:C13H12N2O
ASMTL蛋白抗體β-Carboline-1-propaic acid中文名:β-咔啉-1-丙酸別名:分子式:C14H12N2O2