實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加,。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析,。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析,、基因表達(dá)差異分析、基因分型,。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì),、RNA提取、cDNA合成,、qPCR,。?

優(yōu)點(diǎn)：
(1)操作簡(jiǎn)單，LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,，對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,，產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT．LAMP),，不需要特殊的試劑及儀器,。
(2)快速高效，因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性．避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失．核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,，添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1／2,，多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物,。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,，達(dá)0.5 mg／mL．應(yīng)用專(zhuān)門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,，由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物,。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*,。
(4)高靈敏度,，對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,，比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異,。
用途：
1. 方便,，用戶(hù)只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn),。
2. 快捷,，操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,，能減少污染,，降低實(shí)驗(yàn)誤差,。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料，PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作,。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高,，特異性強(qiáng),。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,，不需要額外的加A 反應(yīng),。
使用及效果：將本產(chǎn)品15 μL 與用戶(hù)自備的模板，引物和水共15 μL 混合后,，直接進(jìn)行PCR反（PCR 參數(shù)由用戶(hù)自己確定）,，反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,，不同的樣本有不同要求,，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4）樣本保存于液氮或干冰,，也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
MRS 瓊脂（MRSA）小鼠垂體細(xì)胞成骨細(xì)胞Caspase-6 ()  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6（抗原）

改良克氏雙糖鐵瓊脂小鼠腦膜細(xì)胞腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Caspase-6 (CT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6（抗原）

Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂小鼠腦脊神經(jīng)元腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞phospho-AMPK alpha 1(Thr172) peptaide  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗原

Todd-Hewitt 肉湯小鼠黑質(zhì)神經(jīng)元腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Caspase-9  白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）

牛心湯培養(yǎng)基小鼠紋狀體神經(jīng)元腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Caspase-9   白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）

BBL瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)小鼠海馬趾神經(jīng)元腦膜細(xì)胞AD7C-P/P/AF peptide   神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽抗原（人）

BL瓊脂培養(yǎng)基小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元神經(jīng)元細(xì)胞Caspase-10   半胱胺酸蛋白酶-10（抗原）

MFC培養(yǎng)基小鼠顆粒細(xì)胞神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞Caspase-13   半胱胺酸蛋白酶蛋白-13（抗原）

FSCN1/FITC  熒光素標(biāo)記纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲(chóng)紫癜 IgG20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框14丹磺酰肼Rat PTEN (Phosphatase and Tensin Homolog) 檢測(cè)試劑盒

FSH/FITC  熒光素標(biāo)記促卵泡刺激素IgG結(jié)締組織生長(zhǎng)因子4-三氟甲硫基甲酰氯Rat MYS (Myosin) 檢測(cè)試劑盒

FSH-R/FITC  熒光素標(biāo)記促卵泡刺激素受體IgG細(xì)胞性T細(xì)胞抗原-44-三氟甲硫基甲酰氯Rat NAGase (N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase) 檢測(cè)試劑盒

FSP/Spastin/FITC  熒光素標(biāo)記抗纖維母細(xì)胞表面抗原IgG降鈣素受體4-三氟甲硫基甲酰氯Rat GAS (N-Acetylgalactosamine 6-Sulfatase) 檢測(cè)試劑盒

FST/FITC  熒光素標(biāo)記抗卵泡抑素IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框381-*基咪唑-4-甲R(shí)at NN-T4 (Neonatal Thyroxine) 檢測(cè)試劑盒

F1 operon positive regulatory protein()/FITC  熒光素標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白（N端）IgG脫羧酶蛋白體361-*基咪唑-4-甲R(shí)at NGF (Nerve Growth Factor) 檢測(cè)試劑盒

F1 operon positive regulatory protein(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白（C端）IgG間隙連接蛋白401-*基咪唑-4-甲R(shí)at NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) 檢測(cè)試劑盒

Gab1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠接頭蛋白Gab 1IgG間隙連接蛋白436-羧基熒光素Rat NGB (Neuroglobin) 檢測(cè)試劑盒
椿皮PCR鑒定試劑盒L-別蘇氨酸TNFRSF17/BCMA (E6D7B) Rabbit mAb (PE Conjugate)

L-醋酸賴(lài)氨酸HS1 Antibody (Rodent Specific)

L-胱氨酸二甲酯二鹽酸CD11c (D3V1E) XP® Rabbit mAb

GSK2636771CD11c (D3V1E) XP® Rabbit mAb

Cbz-L-蘇氨酸芐酯Keratin 19 (BA17) Mouse mAb

(+)-2-甲基-L-絲氨酸Keratin 19 (BA17) Mouse mAb

3,3-二苯基-L-氨酸Met Antibody

α-甲基-L-苯氨酸Phospho-HER3/ErbB3 (Tyr1197) (C56E4) Rabbit mAb

L-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽TFII-I Antibody

L-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)