詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體 |
英文名稱 | Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
登佐鏈霉菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
抗輻射鏈霉菌培養(yǎng),,ATCC菌株
珊瑚鏈霉菌保存,,ATCC菌株
昆明鏈霉菌售價,ATCC菌株
菲律賓鏈霉菌現(xiàn)貨,,ATCC菌株
沙鏈霉菌培養(yǎng),,ATCC菌株
羅倫隱球酵母保存,ATCC菌株
Pseudozymaantarctica售價,,ATCC菌株
磷核糖基轉(zhuǎn)移酶(QPRT)ELISA Kit for Quilinate Phosphoribosyltransferase (QPRT)規(guī)格:48T/96T
甘肽受體3(GALR3)ELISA Kit for Galanin Receptor 3 (GALR3)規(guī)格:48T/96T
Gasdermin A蛋白(GSDMA)ELISA Kit for Gasdermin A (GSDMA)規(guī)格:48T/96T
輸入蛋白9(IPO9)ELISA Kit for Importin 9 (IPO9)規(guī)格:48T/96T
唾液富組蛋白1(HTN1)ELISA Kit for Histatin 1 (HTN1)規(guī)格:48T/96T
葡萄糖磷變位酶5(PGM5)ELISA Kit for Phosphoglucomutase 5 (PGM5)規(guī)格:48T/96T
原鈣黏素β11(PCDHβ11)ELISA Kit for Protocadherin Beta 11 (PCDHb11)規(guī)格:48T/96T
中心體肌動蛋白β(CTRN2)ELISA Kit for Centractin Beta (CTRN2)規(guī)格:48T/96T
抑絲蛋白2(PFN2)ELISA Kit for Profilin 2 (PFN2)規(guī)格:48T/96T
羧肽酶A6(CPA6)ELISA Kit for Carboxypeptidase A6 (CPA6)規(guī)格:48T/96T
突觸融合蛋白11(STX11)ELISA Kit for Syntaxin 11 (STX11)規(guī)格:48T/96T
N-酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)ELISA Kit for N-Acetyltransferase 2 (NAT2)規(guī)格:48T/96T
磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體肝配蛋白A1受體抗體2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose中文名:N-乙酰氨基葡萄糖別名:分子式:C8H156
胚胎干細胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體2-Ami-3-chloro-1,4-naphthoquine中文名:2-氨基-3-氯-1,4-萘醌別名:分子式:C10H6Cl2
CD312抗體2-Ami-6-chlorobenzothiazole中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑別名:分子式:C7H5ClN2S
FLAG Tag標簽抗體(C端)Solvent Yellow 3中文名:溶劑黃別名:分子式:C14H15N3
牛纖維蛋白原抗體3-Acetylcoumarin中文名:3-乙?;鶆e名:分子式:C11H8O3