詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 肺α/β水解酶蛋白3抗體 |
英文名稱 | ABHD3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
磷酯酶CPLC英文名稱:Human Phospholipase C, PLC
酪氨酸激酶2Tyk-2英文名稱:Human tyrosine kinase2, Tyk-2
白介素1β轉(zhuǎn)換酶ICE英文名稱:Human Interleukin 1β converting enzyme, ICE
整合素連接激酶1ILK-1英文名稱:Human integrin-linked kinase 1, ILK-1
末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶TdT英文名稱:Human terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT
吲哚胺2,3-雙加氧酶IDO英文名稱:Human indoleamine 2, 3-dioxygenase, IDO
絲氨酸蛋白酶PRSS英文名稱:Human serine protease, PRSS
脾臟酪氨酸激酶Syk英文名稱:Human spleen tyrosine kinase, Syk
絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶STK英文名稱:Human serine/threonine protein kinase, STK
白介素受體相關(guān)激酶IRAK英文名稱:Human interleukin receptor associated kinase, IRAK
尿激酶UK英文名稱:Human urokinase, UK
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PCK英文名稱:Human phosphoenolpyruvate carboxykinase, PCK
胰蛋白酶trypsin英文名稱:Human trypsin
β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1BACE1英文名稱:Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1, 1BACE1
蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體PDI英文名稱:Human Protein disulfide-isomerase precursor, PDI
肺α/β水解酶蛋白3抗體Saccharomyces cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 瀘州酵母培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Schizophyllum commune提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 遺傳用菌株培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
Yersinia pestis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0132生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Agaricus bisporus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于食用菌,。培養(yǎng)基: CM0017生長條件: 25℃存儲條件: 礦物油法
瑞士乳桿菌種屬: Lactobacillus hveticus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0006生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Botryosphaeria dothidea分離基物: 蘋果果實(shí)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3.0g,,七水硫酸鎂 1.5g,,葡萄糖 20.0g,維生素B1 10mg,,瓊脂 20g,,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,,去皮,,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,,取濾液定容至1000mL,備用,。121℃,15min,。傳代方法: (BNCC測序修正)生長條件: 25℃,,好氧存儲條件: 定期移植法
Salmonla paratyphi A分離基物: 血提供形式: 其他安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 定期移植法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium Mycobacterium sp提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
Photobacterium frigidiphilum分離基物: 沉積物/黑灰與黑色相間沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)淀粉酶、脂肪酶菌株(三丁酸甘油酯法)培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法