詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 促凋亡BNIP3L蛋白抗體 |
英文名稱 | BNIP3L |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
碳鋇(>99%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
酰(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
比布里希猩紅(>90%,BS) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>90%,BS純度:≥98%
檸檬鈣;檸檬鈣四水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
銫(分子生物學(xué)級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99.5%,分子生物學(xué)級純度:≥98%
銅片 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99.5%,厚度0.10.2cm純度:≥97%
化亞銅(>97%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,BR純度:95% 98%
化亞銅(>99%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥95%
2'脫氧鳥苷5'二二鈉鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,,分子生物學(xué)級純度:98%
D葡萄糖醛鈉(> 98%,,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:> 98%,BR純度:≥98%
聚蔗糖70 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥98%
碳胍(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
鹽肼(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
水合鐵(> 99%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:> 99%,BR純度:≥98%
沒食子(>98%,BC) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BC純度:≥98%
肌激酶(比活性:>200 U/mg,BC) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:比活性:>200 U/mg,BC純度:98%
WNT7A 原癌基因wnt7a蛋白一抗 * 0.1ml Exacin
BLK/MODY11 B淋巴細(xì)胞酪氨激酶一抗 * 0.1ml Ofloxacin
COG1 COG1蛋白一抗 * 0.1ml Ofloxacin
BAP31 BAP31蛋白一抗 * 0.1ml Abacavir
ADORA1/Adesine A1 Receptor 腺苷A1受體一抗 * 0.1ml Abacavir
SDHB 鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB一抗 * 0.1ml Nicotinamide
ApoER2 載脂蛋白E2受體一抗 * 0.1ml Nicotinamide
CRMP1 二嘧啶酶相關(guān)蛋白1一抗 * 0.1ml Cyproterone acetate
促凋亡BNIP3L蛋白抗體Corallococcus coralloides分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 粘細(xì)菌分類及藥物篩選培養(yǎng)基: 844生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法
Aspergillus oryzae分離基物: 酒曲提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀酒,。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Aspergillus sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)
Dokdonlafugitiva種屬: Dokdonlafugitiva分離基物: 盆栽土壤安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 108生長條件: 30℃
Babesia ovata分離基物: 血液提供形式: 其他安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于免疫疫苗和診斷試劑的研制,教學(xué)標(biāo)本片的制作,用模式蟲種的制備和提供,蟲種的分類鑒定和一些分析檢測技術(shù)的研究。培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;
Rhodococcus equi分離基物: 沉積物/近海沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)基: 1001生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Escherichia coli分離基物: 病料提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
鏈霉菌種屬: Streptomyces sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Trichoderma sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: 定期移植法