詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點,,咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
精子細胞BWW培養(yǎng)基儲存液 | 500ml | FS-R6429 |
產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基
儲存條件 4℃,12個月
用途 精子細胞BWW培養(yǎng)基
注意事項 無菌溶液。經(jīng)過濾除菌處理,。配置BWW培養(yǎng)基的方法,,每100ml儲存液添加210mg碳酸氫鈉,100mg葡萄糖,,0.37ml乳酸鈉,,丙酮酸鈉, BSA,,10000U 青霉素,,10mg鏈霉素等成分。
配制與標定的實驗原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因,;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,,烘干,。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水、純水洗凈,,烘干,、冷卻。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃,;進樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃;分流進樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,在第1,、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
醛脫氫9家族成員A1(ALDH9A1)ALDH9A1 ELISA Kit鈣離子通道a1F亞型抗體包裝500g
醛脫氫1家族成員A1(ALDH1A1)ALDH1A1 ELISA Kit鈣調(diào)磷B亞基B1抗體包裝100g
趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)CXCR4 ELISA Kit鈣調(diào)蛋白激激α抗體CaMKKα包裝25g
趨化因子C-X-C-基元受體3(CXCR3)CXCR3 ELISA Kit環(huán)腺苷應答元件結(jié)合蛋白H抗體包裝5g
趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)CXCL16 ELISA Kit磷化周期檢測點激1抗體包裝1g
趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)CX3CR1 ELISA Kit鈣激活蛋白12抗體包裝1g
趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)CCR8 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框134抗體包裝5g
趨化因子C-C-基元受體7(CCR7)CCR7 ELISA KitB粘附分子CD239抗體包裝100g
趨化因子C-C-基元受體1(CCR1)CCR1 ELISA Kit胰羧肽B2抗體包裝25g
趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)CCL3L1 ELISA Kit視網(wǎng)膜色變性蛋白26抗體包裝1g
趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)CCL1 ELISA Kit過氧化物體肉堿?;D(zhuǎn)移抗體包裝25g
趨化(CHEM)CHEM ELISA Kit16號染色體開放閱讀框7抗體包裝5g
巰基硫轉(zhuǎn)移(MPST)MPST ELISA Kit16號染色體開放閱讀框57抗體包裝100mg
氫/鉀離子交換ATPβ肽(ATP4β)ATP4β ELISA Kit3號染色體開放閱讀框37抗體包裝1g
氫/鉀離子交換ATPα肽(ATP4α)ATP4α ELISA Kit3號染色體開放閱讀框49抗體包裝250mg
熱帶醋桿菌Acetobacter tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品腫瘤相關抗原試劑盒棕櫚;Palmitic acid
夏威夷鏈霉菌Streptomyces│hawaiiensis 質(zhì)量規(guī)格:純度>99,USP腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子試劑盒芝麻林;Sesamolin
生態(tài)館硝鹽還原菌Nitratireductor│aquibiodomus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品腫瘤壞死因子誘導基因6蛋白試劑盒 ;Levodopa
精子細胞BWW培養(yǎng)基儲存液Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641)/FITC 熒光標記化葡萄糖合成1IgG2,6-二叔丁對 CP,98%
phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216)/FITC 熒光標記化葡萄糖合成激3α/βIgG烯利 >90.0%(HPLC)
GSK-3 Beta /FITC 熒光標記糖原合激-3βIgG石墨 CP,99.85%
GSK-3 Beta(CT)/FITC 熒光標記葡萄糖合成激-3βIgG水合聯(lián)氨 AR,80%溶液
p-GSK-3 Beta/FITC(phospho-Ser9) 熒光標記化葡萄糖合成激-3βIgG三氧化鉬 AR,99.5%
phospho-GSK-3 Beta(Thr390) /FITC 熒光標記兔抗人、大,、小鼠化葡萄糖合成激3βIgG鉬 AR,85.0%
Phospho-GSK-3alpha (Ser21) /FITC 熒光標記兔抗人,、大、小鼠等化葡萄糖合成激-3αIgG高 CP,70.0-72.0%
GSR/GRase/FITC 熒光標記還原IgG高 AR,70.0-72.0%
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,,培養(yǎng)基,,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),,即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例,,可設定50,100,,250,,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。