詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 血管生成素樣蛋白2抗體 |
英文名稱 | ANGL2 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
鹽阿巴卡韋 英文名稱(EN):8Hydroxyquiline (≥99%, crystalline)規(guī)格(SP):25G
鹽阿比朵爾 英文名稱(EN):6Hydroxydopamine (≥97%, 6OHDA)規(guī)格(SP):100MG
鹽阿比朵爾(標準品) 英文名稱(EN):Hemin (BioXtra, from Porcine, ≥98.0%)規(guī)格(SP):1G
鹽阿地芬寧 英文名稱(EN):HAT Media Supplement (50×) HybriMax規(guī)格(SP):1VL
鹽阿地芬寧(標準品) 英文名稱(EN):Guanidine thiocyanate (≥97.0%)規(guī)格(SP):25G
鹽阿可樂定/鹽安普樂定(標準品) 英文名稱(EN):Guanidine thiocyanate (for molecular b...規(guī)格(SP):25G
鹽阿利克侖 英文名稱(EN):Guanidine hydrochloride (≥99.0%)規(guī)格(SP):100G
鹽阿米洛利 英文名稱(EN):Guanidine hydrochloride (for molecular...規(guī)格(SP):100G
鹽阿米洛利(標準品) 英文名稱(EN):Gum arabic from acacia tree規(guī)格(SP):100G
鹽阿米洛利雜質(zhì)(4基,3基二)(標準品) 英文名稱(EN):Glycerol (ACS reagent, ≥99.5%)規(guī)格(SP):100ML
鹽阿米替林 英文名稱(EN):Glycerol (cell culture tested, ≥99%)規(guī)格(SP):100ML
鹽阿米替林(標準品) 英文名稱(EN):Glycerol (for molecular biology, ≥99%)規(guī)格(SP):100ML
鹽阿莫羅芬/鹽阿莫洛芬 英文名稱(EN):βGlycerophosphate disodium (BioUltra...規(guī)格(SP):10G
鹽阿莫羅芬/鹽阿莫洛芬 (標準品) 英文名稱(EN):Glutaraldehyde solution (Grade I, 50% ...規(guī)格(SP):10ML
鹽阿格雷 英文名稱(EN):Glutaraldehyde solution (Grade I, 25% ...規(guī)格(SP):100ML
鹽阿糖胞苷 英文名稱(EN):Glass beads, acidwashed (42500 μm)規(guī)格(SP):10G
鹽阿糖胞苷(標準品) 英文名稱(EN):Solidglass beads (borosilicate, diam....規(guī)格(SP):100G
鹽阿扎司瓊 英文名稱(EN):Solidglass beads (borosilicate, diam....規(guī)格(SP):100G
血管生成素樣蛋白2抗體EL 檢測試劑盒 內(nèi)皮脂肪酶* 規(guī)格: 48T/96T
EK(Human epidermal keratin) 檢測試劑盒 表皮角蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
EJ/GlyRS(Human anti-EJ-antibody) 檢測試劑盒 EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體* 規(guī)格: 48T/96T
EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) 檢測試劑盒 抗流行性出血熱病毒抗體IgM* 規(guī)格: 48T/96T
EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody) 檢測試劑盒 抗流行性出血熱病毒抗體IgG* 規(guī)格: 48T/96T
EHF IgM 流行性出血熱病毒 IgM(間接法二步法)*
EHF IgG 流行性出血熱病毒 IgG(間接法二步法)*