原釩酸鈉溶液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：Anti-ZNF695 Antibody人骨髓抑制因子1
Anti-ZNF7 Antibody人脂聯(lián)素
Anti-ZNF75 Antibody人組
Anti-ZNF875 Antibody人抵抗素
Anti-ZNF76 Antibody人骨特異性堿性磷酸酶B
Anti-ZNFN1A2 Antibody人骨鈣素/骨谷蛋白
Anti-ZNF771 Antibody人可溶

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),，咨詢(xún)并訂購(gòu),！

產(chǎn)品分類(lèi)：酶抑制劑

儲(chǔ)存條件：—20℃,36個(gè)月

用途：廣譜酪an酸磷酸酶抑制劑,又稱(chēng)正釩酸鈉

注意事項(xiàng)：無(wú)色溶液。工作濃度,0.1-1mmol/L,。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水,、純水洗凈,，烘干、冷卻,。

2,、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻,。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣,，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液,，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存，在第1,、3,、7,、10,、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

楊盤(pán)二孢菌*RhoA抗體Anti-DYRK1A Antibody原鈣黏8(PCDH8)

葡萄汁有孢漢遜酵母Rho相關(guān)蛋白激2抗體Anti-DVL3 Antibody原鈣黏7(PCDH7)

河生萊略特氏菌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體Anti-E2F1 Antibody原鈣黏24(PCDH24)

彎曲假單胞菌活性氧簇ROS抗體Anti-E2F2 Antibody原鈣黏22(PCDH22)

擬可可毛球二孢磷化遷移誘導(dǎo)因子5抗體Anti-E2F3 Antibody原鈣黏21(PCDH21)

皮狀假絲酵母磷化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Anti-E2F2 Antibody原鈣黏20(PCDH20)

空腸彎曲桿菌磷化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體Anti-E2F3 Antibody原鈣黏19(PCDH19)

冷解糖芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體Anti-E2F4 Antibody(PB1113)原鈣黏18(PCDH18)

異常漢遜酵母復(fù)制因子A蛋白2Anti-E2F4 Antibody原鈣黏17(PCDH17)

鏈霉菌磷化復(fù)制因子A蛋白2抗體Anti-EAAT3/SLC1A1 Antibody原鈣黏15(PCDH15)

雞傳染性法氏囊病陽(yáng)性血清 Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體Anti-E2F6 Antibody原鈣黏12(PCDH12)

蕈狀芽孢桿菌磷化ras基因相關(guān)蛋白R(shí)ab24抗體Anti-E2F5 Antibody原鈣黏11(PCDH11)

塔賓曲霉磷化ras基因相關(guān)蛋白R(shí)ab24抗體Anti-EAPP Antibody原鈣黏10(PCDH10)

土生類(lèi)諾氏菌磷化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-ECI1 Antibody原卟啉原氧化(PPOX)

釀酒酵母磷化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-EBAG9 Antibody原卟啉(EPP)

焦曲霉磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Anti-ECE1 Antibody3(PRM3)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%

: 長(zhǎng)傳2514資源名稱(chēng): 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格：0.98
原釩酸鈉溶液ATPase Na+/K+protein/FITC  熒光su標(biāo)記鈉鉀ATPmei通道蛋白IgG規(guī)格： 0.2ml

Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser23) /FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠磷suan化鈉鉀ATPmei蛋白a1IgG規(guī)格： 0.2ml

Phospho-Na,K-ATPase alpha-1 (Tyr) /FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠磷suan化鈉鉀ATPmei蛋白a1IgG規(guī)格： 0.2ml

Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser16) /FITC  熒光su標(biāo)記兔抗小鼠,、牛,、豬磷suan化鈉鉀ATPmei蛋白a1IgG規(guī)格： 0.2ml

ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2/FITC  熒光su標(biāo)記ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2IgG規(guī)格： 0.2ml

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基,，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個(gè)濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過(guò)夜,；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。