Schiff試劑公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：雞熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)試劑盒 Anti-SMC3 Antibody(0789)Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM
雞核心蛋白聚糖(DCN)試劑盒Anti-SMARCAD1 AntibodyCy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM
雞肌球蛋白重鏈10(MYH10)試劑盒 Anti-SMARCA4 AntibodyCy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM
雞主要穹窿蛋白(MV

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單,、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購(gòu),！

產(chǎn)品分類(lèi)：碳水染色

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,12個(gè)月

用途：又稱(chēng)雪夫試劑、希夫試劑,主要用于碳水化合物染色：如糖原,粘蛋白,糖蛋白,多糖,透明質(zhì)酸,。又稱(chēng)無(wú)色品紅染色液,。

注意事項(xiàng)：為無(wú)色液體,一般變黃或粉紅應(yīng)棄用。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈,，烘干。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水,、純水洗凈,，烘干、冷卻,。

2,、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻,。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測(cè)器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

三尖杉寧堿(標(biāo)準(zhǔn)品） Mogroside Ⅴ膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體包裝1g

三角葉 Rosavin粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體包裝5g

三棱（標(biāo)準(zhǔn)品） Astilbin粘膜血管定居因子抗體包裝100g

三七（標(biāo)準(zhǔn)品） Loganin抑癌基因抗體包裝25g

三七皂甙R1（標(biāo)準(zhǔn)品） Loganic acid神經(jīng)上皮酪激/癌激10抗體包裝5g

三七皂苷Fa Ophiopogonin DMHC I類(lèi)鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體包裝25g

三七皂苷Fe(標(biāo)準(zhǔn)品) Ergosterol中腦核仁蛋白抗體包裝5g

三七皂苷Ft1（標(biāo)準(zhǔn)品） Ergosterol巨噬移動(dòng)抑制因子抗體包裝1g

三七皂苷R2(R型)(標(biāo)準(zhǔn)品) Vitexicarpin巨噬炎癥因子1α抗體 MIP-1α包裝25g

三七皂苷R2(S型)(標(biāo)準(zhǔn)品) Mangiferin蕈堿型乙酰受體M1抗體包裝5g

（標(biāo)準(zhǔn)品） Mangiferin髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體包裝1g

三肉豆蔻甘油酯 Calycosin絲裂原活化蛋白激激1抗體包裝5g

三葉甙,；三葉苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Calycosin-7-O-β-D-glucoside絲裂原活化蛋白激激2抗體包裝1g

桑白皮（標(biāo)準(zhǔn)品） GC;  (-)-gallocatechin蛋白裂解（一種新的癌基因）抗體包裝5g

桑根L GCG;(?)-Gallocatechin gallate髓鞘堿性蛋白/磷脂堿性蛋白抗體包裝1g

Hel10=DSM14858=NCIMB13941資源名稱(chēng): 赫爾戈蘭簡(jiǎn)納西氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%抗促卵泡抗體試劑盒丹參;Danshensu

多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,藥用級(jí)抗促狀腺受體抗體試劑盒靛藍(lán);Indigo

多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格：>98.0,BR抗補(bǔ)體1q抗體試劑盒α-倒捻子;α-mangostin
Schiff試劑MIP-3 Beta  大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3β規(guī)格： 48T

MIP-4  大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-4規(guī)格： 48T

MIP-5  大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-5規(guī)格： 48T

MCP-1  大鼠巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1規(guī)格： 48T

Ret MMP-9  大鼠血清金屬基質(zhì)蛋白mei-9規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基,，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,，其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。